[发明专利]与生物分子连接的聚氧化亚甲基-氧化乙烯共聚物

说明书

本发明涉及提高活性的生物因子，它包括生物分子共价地键合到一种或多种合成的聚合物上，其中所说的合成聚合物是由氧化亚甲基-氧化乙烯部分结构衍生而来的。

许多为治疗目的而被给药使用的生物学上的分子（生物分子）通过肾小球过滤作用从循环中迅速地清除出去，因而，显示相当短期的药理活性。正是由于这样迅速的清除作用，所以常常需要在较频繁的间隔给予大量的生物分子，以便达到所要求的治疗响应。曾有报导，在许多情况下，该治疗试剂的清除时间可以通过水可溶的聚合物的共价接合而被延长，这类水可溶聚合物的实例有聚乙二醇、乙二醇与丙二醇的共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮和聚脯氨酸[Abuchowski  and  Daris，Soluble  Polymer-Enzyme  Adducts.In：Enzymes  as  Drugs，Holcenderg  and  Roberts，eds.，Wiley-Interscience，New  York，NY，1981，pp.367-383;Newmark，et  al.，J.Appl.Biochem.4：185-189（1982）;katre，et  al.，proc.Natl.Acad.sci.USA  84：1487-1491（1987）]。要求与这些聚合物的接合是为了提高更多疏水性药品在水中的溶解性、消除肽和蛋白质的聚集作用并大大地减少它们的免疫性和抗原性，通常可以提高治疗试剂的物理和化学的稳定性。对于蛋白质和肽[Fuertges  and  Abuchowski，J.controlled  release，11：139-148（1990）]、低分子量治疗试剂[Zalli  psky  et  al.，Eur.polym.J.，19：1177-1183（1983）]以及，新近对于脂质体类[Woodle，et  al.，US  patent  5013556，issued  7th  May  1991]的改进性质均已报导过了。

尽管有许多明确的报导，查阅科技文献表明，共价键连接到合成的水可溶聚合物上没有预示可提高生物分子的生物活性。例如，链激酶-血纤维蛋白溶酶配合物和Pluronic F68，即乙二醇和丙二醇的嵌段共聚物的结合破坏这种酶的活性[Newmark，et al.，J.Appl.Biochem.4：185-189，（1982）]。曾报导过几种蛋白质的葡聚糖结合物对兔、羊和豚鼠是强化地致免疫的[Richter et al.，Int.Arch.Allergy，42：885-902（1972）。尿酸酶的葡聚糖连接物对于小鼠的等离子体半衰期依赖于葡聚糖的电荷情况，阳离子型的和中性的葡聚糖加速蛋白质的消除作用，而阴离子型葡聚糖则提高半衰期[Fujita et al.，J.controlled Release，11：149-156（1990）]。曾已发现，聚乙烯基吡咯烷酮连接物是免疫的[Abuchowski and Davis，Soluble polymer-Enzyme Adducts.In：Enzymes as Drugs，Holcenberg and Roberts，eds.，Wiley-Interscience，New York，NY，1981，PP.367-383]，并且破坏核糖核酸酶的生物活性（Veronese，et al.J.Bioactive comp.polym.，5：167-178（1990））。相反，核糖核酸酶与聚乙二醇（PEG）连接之后则保持它的活性[Veronese，et al.，Appl.Biochem.Biotech.，11：141-152（1985）]。甚至于取代度和连接键的类型都能够影响生物分子的生物活性。例如，1989年4月10日公开的欧洲申请0335423A₂所披露的那样，氰尿酰氯活化的PGE对蛋白质粒性细胞集群激化因子（G-CSF）的渐进连接作用成比例地减少它的体外生物活性。这些例子表明，生物分子与水可溶聚合物的连接作用不可能预示到改进治疗试剂的生物学性质的方法。