[发明专利]好氧发酵生产甘油新菌株及获得方法

说明书

一种好氧发酵生产甘油新菌株及获得方法属于微生物技术领域。

在本发明作出以前，已有技术中用于发酵法生产甘油研究的菌株主要为Saccharomyces  Hansenula、Pichia、Torulopsis、Asperyillus、Lactobacillus、Bacillus等属微生物。Candida  Wl2002-5菌株是主要采用的能产甘油的耐高渗压酵母菌株，在含葡萄糖23-25%，发酵液甘油含量达12%以上，糖转化率50%，甘油产率达30克/升、天。该菌株的不足之处是在发酵液中葡萄糖含量低于1-2%时，要同化甘油。致使继续发酵时发酵甘油含量下降，导致发酵最佳放罐时间难于控制。若年产1000吨发酵甘油的工厂，发酵液含量下降0.3-0.5%，一年即损失甘油达50吨，经济损失严重。

本发明的目的在于克服上述不足之处，从而提供一种既保持高产甘油的特性，又不同化或微同化甘油的新菌株及获得方法。

本发明的主要解决方案是采用吖啶黄或溴化乙锭或其它理化因子为诱变源，在TTC（2、3、5-氧化三基四氮唑）的选择性培养基上进行挑选并定向筛选，获得呼吸缺陷型菌株，在含葡萄糖、玉米浆或酵母浸出汁、尿素或硫酸铵的培养基中进行通风发酵、不同化或微同化发酵液中甘油特性的变异株。

实施例：

本发明是以氧化型产甘油菌株Candida  sp为出发菌株，采用0.05-0.5%吖啶黄或10-50ug/ml溴化乙锭或其它理化诱变因子为诱变源，在含0.05-0.1%TTC（2、3、5-氧化三苯基四氮唑）的选择性培养基上进行挑选并定向筛选，获得呼吸缺陷型（rho）的产甘油变异株。采用原生质体转化技术也可达到同一目的。

应用上述定向育种方法选育的Candida  sp、衍生变异株在含葡萄糖18-30%、玉米浆或酵母浸出汁0.1-0.6%，尿素或硫酸铵0.1-0.3%，PH3.5-6.0的培养基中进行通风发酵，在残糖达到最低水平1-2%时，继续发酵10-34小时，不同化或微同化发酵液中甘油特性的变异株Candida  sp。糖转化率达到55%，甘油产率可达35克/升、天。

本发明与已有技术相比具有以下优点：1、无需增加设备、工艺简单、能使甘油产量有较大提高;2、投资少、得益高、简易可行，易于推广。

本发明：

保藏日期：一九九三年五月二十九日

保藏中心保藏编号：CCTCC  NO：M93018

保藏单位：中国典型培养物保藏中心