[发明专利]生物制菌王及其生产方法

权利要求书

1、一种用于防治动物细菌病和促进动物新陈代谢的生物制剂--生物制菌王，其主要成份为：噬菌蛭弧菌、宿主菌以及微量元素Ca、Mg、Zn、Fe，其中噬菌蛭弧菌与宿主菌的比例为1∶10--1∶10万；微量元素含量分别为Ca=1.0-10.0mg/l，Mg=2.0-11.0mg/l，Zn=2.0-15mg/l，Fe=0.1-1.5mg/l；pH值为3.0-9.8。

2、根据权利要求1所述的生物制菌王，其特征在于：噬菌蛭弧菌与宿主菌的比例为1：10³-1：10⁴;Ca含量为3.0mg/l，Mg含量为3.5mg/l，Zn含量为3.2mg/l，Fe含量为0.25mg/l;pH值为7.4。

3、根据权利要求1或2所述的生物制菌王，其特征在于宿主菌为对噬菌蛭弧菌敏感的、不产毒素的、非致病的失活菌体。

4、根据权利要求3所述的生物制菌王，其特征在于宿主菌为大肠杆菌。

5、根据权利要求3所述的生物制菌王，其特征在于噬菌蛭弧菌能在失活的宿主菌上，于37-43℃环境中生长增殖。

6、一种生产权利要求1的生物制菌王的方法，包括以下工艺步骤：

（1）用常规方法制取宿主菌悬液并用灭菌蒸馏水离心洗涤三次以上;然后，

（2）加入灭菌蒸馏水配制成含菌量在20亿/ml以上的菌悬液;然后，

（3）在70-150℃下，加热至少15分钟，或者用1/5-1/10量（体积）氯仿作用1小时以上，制得失活宿主菌;

（4）以步骤（1）-（3）制得的失活宿主菌为宿主，用噬菌蛭弧菌常规培养法制取其培养物;然后，

（5）选择于25-30℃环境中在自来水双层琼脂平皿上噬斑典型的噬菌蛭弧菌，挑取单噬斑浸泡于灭菌自来水中4-6小时;然后，

（6）取上清再制双层琼脂平皿，调高温度3-5℃培养，反复数次，直至选育出在37-43℃环境中能生长的噬菌蛭弧菌;

（7）将通过步骤（1）-（3）制得的失活宿主菌和通过步骤（4）-（6）制得的噬菌蛭弧菌按比例1：10-1：10万悬浮在含有微量元素Ca（1.0-10.0mg/l）、Mg（2.0-11.0mg/l）、Zn（2.0-15mg/l）、Fe（0.1-1.5mg/l）的稀释液中，37-43℃培育10-24小时，校正其pH值在3.0-9.8范围内，即得生物制菌王。