[发明专利]血吸虫疫苗肽

说明书

本发明属于有机化合物。

目前对血吸虫疫苗的研究主要集中在照射减弱活疫苗和可溶性抗原疫苗两方面。照射减弱活疫苗的研究历史较长，在制备和应用方面已积累了较成熟的经验，在实验室和动物实验上已取得了较好结果。但该种疫苗还存在以下有待解决的问题，(1)大量注射引起的局部炎症，(2)疫苗的安全性，如过敏反应，(3)疫苗的致病性，如灭活不完全造成的感染，(4)大规模制备疫苗时虫子的来源不足。为了避免上述缺点，人们正在积极从事合成的可溶性抗原疫苗的研究，此种疫苗的重要意义在于，可以采用人工大量合成。经人工合成的疫苗接种量小，可以减少异种蛋白的过敏反应，并可大量制备，且无灭活不完全造成的致病危险，有实际应用前景。

本发明的目的在于提供了一种可用于制备血吸虫疫苗的多肽，其优点在于用其制成的疫苗接种量小，可以减少异种蛋白的过敏反应，无灭活不完全造成的致病危险，并可以采用人工大量合成。

本发明所涉及的有机化合物-多肽，即是血吸虫可溶性抗原疫苗多肽，其特征在于化学结构如下所示：

A-HN-B-C-D-Lys-E-F-G-H-Lys-Leu-Ala-ValGly-X

在上式中：

A为氢，在这里：

B为-Glu-，-Asp-，-Gln-，-Asn-.

C为-Ser-，-Thr-.

D为-Leu-，-Gln-，-Asn-.

E为-Gly-，-Pro-.

F为-Ser-，-Thr-.

G为-Thr-，-Ser-.

H为-Gly-，-Pro-.

X可以为下列形式：

i)-COOH

或ii)-CONHR₁

在这里，R₁为氢或C₁-C₃烷基。

本发明涉及的多肽可以以其自由形式存在，也可以以盐的形式或复合物的形成存在。例如可以和有机酸，高聚物酸和无机酸形成盐，这种形式的盐有盐酸盐，乙酸盐。再如，可以和无机物，如无机盐或氢氧化物，形成象Ca²⁺或Zn²⁺盐。也可以和高聚有机物形成复合物，以及和药物可以接受的稀释剂和载体形成的复合物。

本发明涉及的多肽可以用已知的多肽化学方法来合成及生产，如下述实施例，并且也可以用与本实施例明显等价的化学合成方法或固相合成法来合成及生产。

本发明涉及的多肽及其药物可以接受的盐和复合物在生物活性检测和动物实验中表明均有有价值的药物活性。特别是在抗血吸虫病方面，通过免疫兔子实验表明有很高的减虫率。本发明涉及的多肽在动物实验中的用量范围为0.001到100ug/kg体重。

              实施例1

                 Boc-Val-Gly-OBzl

2.6g Boc-Val溶于THF中，加入少量DMF，加入1.62g HOBt搅拌溶解，冰水浴冷却，加入2.5g DCC搅拌溶解10分钟，将2.11g Gly-OBzl·HCl溶于DMF中，加入1.14-1.18mLNMM调pH7.0-7.5，然后滴加到反应液中，搅拌过夜，过滤，除去溶剂，固体用乙酸乙酯溶解，然后用5％KHSO₄，5％NaCl，5％NaHCO₃，5％NaCl水溶液依次洗涤，有机相用无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩得固体3.96g，收率88.4％，在乙酸乙酯--石油醚(30-60)中重结晶，熔点59-61℃，[α]_D²⁹＝-20°(C＝1.0，甲醇)。

                  Val-Gly-OBzl·HCl

3.5g Boc-Val-Gly-OBzl溶于乙酸乙酯中，加入4N HCl/乙酸乙酯溶液，搅拌到脱保护完全，有黏稠状物析出，浓缩得油状物2.5g，收率87％。

                Boc-Alla-Val-Gly-OBzl