[发明专利]活化根际土壤磷并有增产作用菌剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于活化根际土壤磷并对农作物有显著增产作用的PG₁微生物菌剂。

在世界范围内，土壤缺磷面积分布很广，特别在干旱、半干旱地区，中性和偏碱性土壤有效磷更缺乏。为了提高农作物产量，施入各种磷肥，土壤中有效磷虽有增加，但是大部分磷仍然被固定于土壤中。磷肥的利用率大约在5-25％之间。近年来国内外磷肥价格上涨，磷矿品位下降，磷肥来源受到某种程度的限制。土壤中磷的利用以及提高磷肥的利用率仍是农业生产中的重要问题。为此，世界各国对于利用土壤微生物改善根际条件，活化根际土壤磷，增强难溶磷的转化，提高磷肥利用率，给予广泛的关注。我国磷细菌研究起步较早，但是多限于解磷细菌筛选和作为磷细菌肥料施于土壤中，效果不十分显著。

本发明目的在于，研制的活化根际土壤磷并有增产作用的PG₁菌剂，该菌剂中含有假单孢菌，在制备中，首先进行原菌种培养，然后进行液体发酵培养，在后处理中可用轻质碳酸钙吸附、烘干，粉碎包装。该PG₁菌剂繁殖力强，在24-36小时内发酵培养可达到200亿/毫升，耐低温和高温，耐盐碱和干旱，对逆境有较强的抵抗能力。根据根系、土壤和根际微生物相互作用原理，定向改变根际微生物区系，使其有益根际微生物占优势，改善根际微环境，促进农作物生长发育，提高作物产量。

本发明的任务是：PG₁菌株是从植物根际土壤中分离出的假单孢菌属(Pseudomonas)中的一个种，用PG₁菌剂拌种粘在种子上，随种子进入土壤之后，随种子萌发生长，生根后，大量繁殖，当地温升高之后，作物根系迅速生长发育时，PG₁菌大量繁殖并聚集于根际，在根际微生物区系中占优势(已用抗菌素标记法证实)。PG₁产有机酸，降低根区PH值，使根际微环境酸化，促进难溶磷的转化，提高根际土壤有效磷含量。同时PG₁菌产生赤霉素和细胞分裂素，可促进根系生长发育，促进磷的运输和吸收。

本发明研制的活化根际土壤磷并有增产作用的PG₁菌剂，该菌剂含有假单孢菌，经鉴定归属于假单胞菌属(Pseudomonas)中的一个种PG₁并在北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，No.0208。

本发明研制的活化根际土壤磷并有增产作用的PG₁菌剂的制备方法，其主要特点：

(a)、PG₁菌株菌落形态，在BPM平板上园形、湿润，边缘整齐，凸起，透明无色素；

PG₁试管斜面培养特征，凸起，产较多粘液，淡黄褐色，液体培养混浊；

PG₁个体形态：细胞直细杆状，0.5-0.6×2-3μm，革兰氏染色阴性，无芽孢，极生鞭毛，运动，原生质染色不均匀。

(b)、PG₁菌理化特性：过氧化氢酶反应呈阳性；接触酶反应呈阳性；精氨酸双水解酶反应呈阳性。好氧，不发酵，不产气W.P(甲基乙酰甲醇试验)反应阴性； W.P(甲基乙酰甲醇试验)培养液生长4天后PH值降到5.4，甲基红实验阳性；水解酪素；液化明胶，不水解淀粉，不还原硝酸盐；水解蔗糖不形成果聚糖：产生可溶性色素，不产类葫萝卜素，在碳源利用方面，可利用甘油、葡萄糖酸盐、丙二酸盐、甘露醇、阿拉伯糖、葡萄糖、木糖、肌醇、鼠李糖、海藻糖、山梨醇、核糖和柠檬酸盐。不利用酒石酸盐、乳糖和蔗糖。在PH7.2-7.5培养基上含盐量在7％的培养基上能生长。最高耐受温度95℃，最低在0-4℃； 20-40℃均可生长。

在制备方法上其主要是(a)、原菌种培养基配方为(以容量1000毫升为基数)牛肉膏0.8-4克，蛋白胨1-4克，用糖度为巴林7°-10°的麦芽汁定溶1000毫升，用氢氧化钠调PH7.0-7.5，琼脂粉18-20克，培养温度20-30℃，进行活化两次，每次为36-38小时，进入三角瓶或茄子瓶摇床培养，时间为24-36小时，然后接种子罐发酵培养；