[发明专利]纯化的低分子量肝素,其制备方法和含有它们的药物组合物

权利要求书

1．可通过亚硝酸降解天然来源肝素得到的低分子量肝素或其药用盐，所述低分子量肝素具有以下特征：

-平均分子量小于8000Da，

-其组分总数的至少60％平均分子量低于8000Da，

其中它的N-NO化合物总含量不超过500ppb。

2．根据权利要求1的低分子量肝素或其药用盐，其特征在于它为来自豪猪肠粘膜或小牛肺的天然来源肝素或从各种动物组织或器官中提取的肝素通过亚硝酸降解得到的低分子量肝素的药用盐形成，其具有以下特征：

-平均分子量低于8，000Da，

-其组分总数的至少60％平均分子量低于8，000Da，

-抗因子Ⅹa活性不低于60IU/mg，

-抗因子Ⅹa/抗因子Ⅱa活性比不低于1.5。

3．根据权利要求2的低分子量肝素或其药用盐，其为钠盐或钙盐形式。

4．根据权利要求1的低分子量肝素或其药用盐，其特征在于它为源自豪猪肠粘膜的天然肝素经亚硝酸降解得到的低分子量肝素钠盐，其具有以下特征：

-优势分子量为1，700Da到3，300Da之间，

-其组分总数的90％分子量在1，000Da到8，000Da之间，

-其大部分组分在非还原末端有2-O-磺基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸结构，在还原性末端有6-O-磺基-2，5-脱水-D-甘露糖醇结构，

-硫酸化率为2.1，

-抗因子Ⅹa活性为60-80IU/mg，

-抗因子Ⅱa活性不大于25IU/mg，

-N-NO化合物的总含量不超过100ppb。

5．根据权利要求4的低分子量肝素或其药用盐，其特征在于N-NO化合物的总含量不超过50ppb。

6．权利要求1低分量肝素或其药用盐的制备方法，其特征在于将浓度为5-15％m/V的经亚硝酸降解得到的低分子量肝素水溶液暴露于波长为180-350nm的紫外线照射之下，温度5℃到50℃，溶液的pH为3-8。

7．根据权利要求6的方法，其特征在于15-35℃的温度及pH5-8下，暴露在254nm紫外线下。

8．权利要求1的低分子量肝素或其药用盐的制备方法，其特征在于：

(a)5-15％m/V的未降解肝素钠盐水溶液用亚硝酸钠溶液，以每kg所引入肝素15-69克亚硝酸盐的比例，在盐酸存在下，pH1-5下处理20-50分钟，由此得到的产品用5-20克硼氢化钠/千克开始时引入的肝素进行还原，过量的硼氢化钠用盐酸破坏，并用乙醇沉淀产品，然后

(b)由此得到的溶液进行紫外照射

(c)通过用氯化钠和乙醇沉淀分离纯化的不含N-NO化合物的低分子量肝素钠盐。

9．根据权利要求8的方法，其特征在于(a)步中在pH1.5-4下用亚硝酸钠溶液处理。

10．根据权利要求8的方法，其特征在于(a)步中硼氢化钠还原在碱性介质中进行。

11．根据权利要求8的方法，其特征在于(a)步中用盐酸破坏过量的硼氢化钠后中和反应介质。

12．根据权利要求8的方法，其特征在于(a)步中还包括对乙醇沉淀的低分子量肝素产品进行一次或多次醇分级。

13．根据权利要求8的方法，其特征在于(c)步中先进行色谱纯化。

14．根据权利要求8的方法，其特征在于该方法还包括步骤(d)将钠盐转化为另一种药用盐。

15．权利要求1的低分子量肝素或其药用盐的制备方法，其特征在于；

(a)未降解肝素钠水溶液用盐酸和相对于所引入肝素的3.5-4％(重量)的亚硝酸碱金属盐处理，保持pH酸性，监视亚硝酸根离子的存在直至出现阴性反应，然后将混合物碱化，用硼氢化钠还原产品，在中性介质中通过用乙醇沉淀分离降解产品，然后

(b)将由此得到的产品水溶液在pH 7时置于254nm的紫外线照射下，然后将由此得到的溶液导入一阴离子交换柱的顶部，用水洗脱柱子后及pH 7时，用氯化钠和乙醇沉淀回收终产品。