[发明专利]真菌除草剂的生产方法

说明书

本发明涉及一种有效形成植物致病性霉菌的分生孢子的方法，这些分生孢子用作真菌除草剂。

近年来，化学合成除草剂对环境的污染已成为一个严重问题。另一方面，已知自然界有一些微生物对杂草具有特异的致病性。象除草剂一样使用致病性微生物来防治其特异性杂草而致使其死亡，称为“真菌除草剂杂草防治法”。它已作为一种高度安全的杂草防治方法而引起了注意。例如用盘长孢状刺盘孢作为致病性微生物来防治弗吉尼亚田皂角（Aeschynomene virginica），这种植物是稻田和大豆田中的一种杂草（Daniel.J.T.等，Weed Sci.21：303-307，1973）。另外，最近在日本特许公开219883/1991和226905/1992中报道了德斯霉属的微生物（Drechslera sp.）是对稗草（Echinochloa）具有选择性致病性的真菌除草剂，而稗草多年来一直是讨厌的低地杂草。

如果作为真菌除草剂使用的植物致病性微生物是一种霉菌，那么其菌丝体由于耐贮藏性差而很少直接使用，而是由这些菌丝体形成分生孢子，然后再作为真菌除草剂使用。

霉菌的分生孢子一般是用大麦、碎玉米、稻或麸以固体培养法形成，或者是用通气搅拌发酵罐以液体培养法形成。固体培养法有一些缺点，大量形成分生孢子时需要宽广的空间，易发生各种细菌的污染，培养条件不易控制。其中有些问题可以通过改用液体培养法来解决。对于不易在液体中形成分生孢子的霉菌，比如德斯霉属的霉菌，则不能直接应用液体培养法来生产分生孢子。

作为解决这些问题的方法，Matsuura报道了可以用一种两步培养法来形成分生孢子，这种方法是在聚氨酯泡沫基质存在下，将霉菌如稻梨孢或稻长蠕孢置于300ml培养瓶中振荡，使其菌丝在泡沫基质上生长，从培养瓶中取出得到的泡沫基质，再在控制在恒定湿度的空气中放置（Matsuura.K.，J.Takeda Res.Rab.，32：427-495，1973）。

实际上，本发明人曾试图将上述两步培养法应用于用作真菌除草剂的霉菌（如德斯霉属的霉菌）分生孢子的形成。但所形成的分生孢子太少，因此认为，这种两步培养法作为形成用于真菌除草剂的分生孢子的实用方法有严重的问题。

本发明的一个目的是提供一种有效形成植物致病性霉菌的方法。

本发明人为了建立一种用泡沫基质以两步培养法有效形成可用作真菌除草剂的霉菌（如德斯霉属的霉菌）分生孢子的方法，进行了广泛的研究。结果发现，在已加入泡沫基质和C_12-22脂肪酸或其酯的培养基上通气培养植物病原性霉菌，将泡沫基质置于空气中静置或搅拌以形成霉菌的分生孢子，从泡沫基质中分离出所形成的分生孢子，可以使分生孢子的产量显著提高，从而完成了本发明。

所以，本发明提供一种形成用于真菌除草剂的分生孢子的方法，该方法包括：在已加入了泡沫基质和C_12-22脂肪酸或其酯的液体培养基上通气培养植物病原性霉菌，将泡沫基质在空气中放置以形成霉菌的分生孢子，从泡沫基质中分离并收集得到的分生孢子。

图1是由本发明的新变种单角德斯霉小孢变种形成的酯酶的酶谱。

图2是由常规变种单角德斯霉单角变种形成的酯酶的酶谱。