[发明专利]潜在手印显现剂及其制备方法和应用

权利要求书

1、一种潜在手印显现剂，其特征在于包括乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus(Beijerinck)Baumann，Doudoroff et Stanier)。

2、一种制备如权利要求1所述的潜在手印显现剂的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)取样：用下列方法之一：

a、用磷酸盐缓冲液棉签法洗涤人手指前端汗液，缓冲液组份为：磷酸氢二钠9.0—12.2克，氯化钠8.0—9.5克，磷酸二氢钠3.0—5.5克，蒸馏水500—1500毫升，PH值为6.0，

b、取自然界土壤用无菌水稀释至10^-1—10^-3，

c、取自然界污水，

(2)液体培养基增菌：

培养基选用下列之一：

a、OPMS培养基：

磷酸二氢钠13.5—17.5克，硝酸钾16.0—22.5克，氯化钾5.5—8.5克，硫酸钠5.0—8.6克，氯化钙15.0—23.5毫克，氯化镁0.2—2.5克，钼酸钠0.01—0.6毫克，油酸15.0—23.5毫克，硬脂酸1.5—3.8毫克，软脂酸1.5—3.8毫克，肉豆蔻酸1.5—3.8毫克，将上述物质溶解于1升蒸馏水中后稀释10倍不高压，

b、摇瓶培养基：

醋酸钠0.01—0.4克，硝酸钾0.01—0.4克，硫酸镁0.01—0.4克，将上述物质溶解于1升蒸馏水中后稀释10倍不高压，

培养方法选择下列之一：

a、将汗液洗涤液接种于OPMS培养基内，混浊度为1∶4000—12000，摇动10—30秒，25—32℃培养24—48小时，或接种于摇瓶培养基内摇床培养24—36小时，

b、取土壤稀释液4—10毫升加OPMS培养基20毫升，再加入醋酸钙0.3克，PH值5.5，温度25—32℃培养24—48小时，或接种于摇瓶培养基内摇床培养24—36小时，

c、取污水4—10毫升加培养基30—150毫升，再加入醋酸钙0.4—1.6克，倾注30℃培养18—48小时，或接种于摇瓶培养基内摇床培养24—36小时，

(3)分纯

用平板划线法分纯，

(4)OPMS琼脂确认

将琼脂溶解于蒸馏水15分钟，再与不高压的OPMS培养基混合制得OPMS琼脂，将得到的菌接种于OPMS琼脂上培养可确认为乙酸钙不动杆菌，

(5)低温真空干燥法或斜面用液体石蜡法保存制得潜在手印显现剂。

3、如权利要求1所述的潜在手印显现剂的应用方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)增菌：将潜在手印显现剂用培养基斜面增菌后，加入磷酸盐缓冲液于斜面试管内轻摇，使其成为菌悬液，再将菌悬液离心20—30分钟，

(2)配菌悬液：离心后，取菌体用含10^-3—10^-2的OPMS培养基的磷酸盐缓冲液(PH5.5—6.0)配制成含菌体浓度为10⁷—10⁸个/毫升的菌悬液，

(3)显现手印：将留有潜在手印的客体。以有手印的一面朝上浸泡于配好的菌悬液中，在温度为30℃下培养24—48小时，取出被显客体浸入清水中5—10分钟取出晾干，用加热法将细菌固定，

(4)染色：将被显客体浸入配制好的氨基黑蛋白染色液中染色5—10分钟，

(5)漂洗：将被显客体从染色液中取出，置于磷酸盐漂洗液中漂洗至背景干净为止，取出干燥后手印即呈淡蓝色显出。

4、根据权利要求2所述的潜在手印显现剂的制备方法，其特征在于：所述的磷酸盐缓冲液组分的最佳值为：磷酸氢二钠10—11克，氯化钠8.5—9克，磷酸二氢钠4—5克，蒸馏水1000毫升，PH值为6.0，所述的OPMS培养基的组分最佳值为：

磷酸二氢钠14.5—16克，硝酸钾19—21克，氯化钾6.5—8克，硫酸钠6—7克，氯化钙18.0—23毫克，氯化镁0.8—2克，钼酸钠0.1—0.4毫克，油酸18.0—21毫克，硬脂酸2—3毫克，软脂酸2—3毫克，肉豆蔻酸2—3毫克，将上述物质溶解于1升蒸馏水中后稀释10倍不高压，

所述的摇瓶培养基的最佳值为：

醋酸钠0.1—0.3克，硝酸钾0.1—0.3克，硫酸镁0.1—0.3克，将上述物质溶解于1升蒸馏水中后稀释10倍不高压。