[发明专利]分子筛浓缩用品

说明书

本发明涉及分子筛浓缩技术领域，专用于样品浓缩，去除样品中的离子，水份和小分子物质，保留所需要的蛋白质、核酸以及其它大分子物质，提高样品浓度，尤其适合于少量样品的浓缩。

样品浓缩技术是一项用途十分广泛的实验技术，通常采用物理或化学的方法进行样品浓缩，现有技术中有冷冻干燥法，沉淀法，透析法，聚乙二醇吸收法以及硅胶吸收法等。虽然这些实验技术都有一定浓缩效果，但它们在使用中又受到一些条件限制，有的使用不方便，有的对样品会产生不利影响或者造成样品损失等。如冷冻干燥法是将蛋白质溶液冷冻干燥，但它们需要真空条件，有机溶剂或无机盐虽然可以使蛋白质沉淀，但它还可以引起蛋白质的某些变性;另外，利用渗透压的原理，将样品装入透析袋中，用聚乙二醇干粉或硅胶吸收水分，也是常用的样品浓缩方法，但它需要较长的时间，而且由于非特异性吸附作用，样品损失很大，尤其不适合少量样品的浓缩;目前也有各种商品浓缩器问世，它是利用一个物理性能强韧的半透膜滤器代替普通的透析膜，虽然这种商品浓缩器使用比较方便，但其价格昂贵，且它的膜对蛋白的非特异性吸附较强。

本发明的目的在于，针对上述现有样品浓缩技术的缺陷，研制提供一种使用方便，不需任何特殊条件，不引起蛋白质变性，时间短，价格低，效果好的分子筛浓缩用品。

本发明所提供的一种分子筛浓缩用品，其生产方法包括：

1、按聚丙烯酰胺凝胶常规比例称取丙烯酰胺（Acr），甲叉双丙烯酰胺（Bis），过硫酸胺（Ap），加水至刻度，混匀配制成胶液，另量取四甲基乙二胺（TEMED）液;

2、将胶液抽气过滤后再加入TEMED液，混匀制成胶液1;

3、将胶液1倒入灌胶瓶2内，灌胶瓶底部的出液口3连接一段乳胶管4，乳胶管的另一端以阀门5与滴管6相连;

4、将胶液灌入成型模具7内，成型模具必须同时具备耐强酸强碱和醇酮的特点;

5、待胶液充分聚合后，将凝胶连同成型模具一起放入50-70%的醇类或酮类脱水剂内4-8小时，取出成型模具，将胶粒倒入无水醇类或酮类脱水剂中浸泡3-5小时，取出胶粒放入30℃温箱内3-5小时烘干成干胶粒;

6、将干胶粒浸泡于水中，变为透明胶后再按步骤5脱水烘干，如此重复三次，取出干胶粒，装袋封口。

生产方法中所用醇类或酮类脱水剂，以甲醇、乙醇、丙醇或丙酮、丁酮为好，成型模具的材料以塑料或玻璃为最佳。

本发明所提供的分子筛浓缩用品与现有样品浓缩技术相比具有显著优点和积极效果，它利用了聚丙烯酰胺凝胶具有可调控的三维网孔结构的特性和分子筛效应的原理，使用时将干胶粒投入样品溶液中，便可以吸收溶液中的水份和比其网孔直径小的分子，保留分子量较大的蛋白质、核酸和其它大分子物质，从而达到浓缩样品的目的。因为干胶粒网孔大小可以通过改变胶液的浓度及交联度来控制，使用时可根据溶质分子大小的要求，选择适当型号的干胶粒即可，因此，分子筛浓缩干胶具有使用简便，吸水强，浓缩效果显著，生产工艺简单，成本低廉等优点。由于干胶粒可以做成任何形状（图3、图4），如a柱粒形，b管形c锥形等，尤其是锥形与样品接触面积小，不会损失样品，适合少量样品浓缩。此外，可以定制成型模具，批量生产不同规格、型号、形状的分子筛浓缩用品。

图1、分子筛浓缩用品生产工艺流程图

图2、灌胶瓶2结构示意图

图3、干胶粒实物照片

图4、成型模具7结构、形状示意图

下面结合附图详细介绍本发明的实施例。

1、制胶液：称取20克Acr，0.5克Bis，0.17克AP，加水至100ml，混匀配制得100m120%的标准胶液（配方比例见参考文献P.109表3-9），另量取TEMED液10μl;将标准胶液用抽滤装置（实验室通用）进行抽气过滤后，加入TEMED液，混匀配成胶液1。

2、灌胶：将胶液1倒入灌胶瓶2，灌胶瓶底部的出液口3与一段乳胶管4相连，乳胶管以阀门5与滴管6相连;将灌胶瓶内的胶液滴入成型模具7内，成型模具7由塑料或玻璃或其他耐强酸强碱和醇酮的材料做成，模具中胶粒模型可以做成粒形，柱形或锥形（见图3）以及其他任何形状;

3、粗制干胶粒：待成型模具中的胶液充分聚合（约0.5-1小时）后，连同成型模具放入50-70%甲醇、乙醇、丙醇或丙酮、丁酮或其他醇类酮类的脱水剂中4-8小时后，取出成型模具，其中的胶粒已脱水收缩，将胶粒倒入无水醇类或酮类脱水剂中浸泡3-5小时，这时胶粒已全部变成乳白色，再将胶粒取出置于30℃温箱内3-5小时烘干，制得干胶粒粗成品。