[发明专利]粘膜的竞争性排斥菌群

说明书

发明的技术背景

发明的技术领域

消费未经适当处理的家禽产物现已导致了大量的人类肠道疾病患者。人们早已认识到沙门氏菌属是这些疾病的成因性病原体，最近发现弯曲杆菌属(Campylobacter spp.)，特别是空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)也在其中起作用。这两种微生物能集群在家禽的胃肠道中，而对鸟类没有任何有害的影响，并且即使一些有病的鸟类能被检查出来，但是无症状表现的携带者仍能在其生产和加工过程中自由地传播微生物，结果导致进一步污染活的鸟类以及它们的尸体。

相关技术的描述

需要更好的控制措施来使这些以及其它的人类肠道致病菌的传播减少至最小程度，达到此目的的最有效的办法是降低微生物在家畜胃肠道集群的发病率和数量。

降低小鸡中沙门氏菌属集群的有效方法已由Nurmi和Rantala(1973)阐述，并将其称为竞争性排斥(CE)。小鸡的自然肠道菌群在抗沙门氏菌属集群中起着非常重要的作用。人们发现来自成熟、健康小鸡的肠道内含物的传代培养的制剂可将保护传给还没有建立微生物菌群(microflora)的幼年小鸡。将未确定的CE制剂施用于小鸡，加快了刚孵化鸟类的肠道菌群的成熟，而且还提供了微生物菌群成年鸡传递到其后代这一自然过程的替代物。现代培育室中干净和消毒了的设备不能提供过去由母鸡提供的自然发生的微生物菌群。Snoeyenbos等人(1982)开发了一种减少家禽中沙门氏菌的技术，其中CE微生物菌群的来源是通过无氧培养而繁殖的冷冻干燥的粪便的滴下物。Nikkola等人(1987)运用肠内的粪便和盲肠的内含物作为CE微生物菌群的来源。对它们的培养物的处理要求培养基为无氧，并平衡pH值。这些CE处理没有提到空肠弯曲杆菌。

因为已知CE抗沙门氏菌属有效，Stern等人(1988)试验了防治弯曲杆菌属的类似方法。然而，发现用CE制剂的处理(如Hurmi和Rantala(1973)，Snoeyenbos等人(1982)和Mikkola等人(1987)所描述的)不能影响弯曲杆菌的集群。用五种不同的CE培养物进行处理之后，在84只小鸡中的81只和46只对照组小鸡的45只中观察到在受到弯曲杆菌属攻击后产生的集群。Shanker等人(1990)证实了这些观察结果(Shanker等人，1990，Epidemiol.Infect.，Vol.104，pp.101-110)。

在随后的试验中，将沙门氏菌属和弯曲杆菌属的混合物的组合物施用到几天大的小鸡中。人们认为这两种微生物可能互相竞争或者互相对抗，由此减少它们两者的数量(Stern等人，1991)。然而结果并没有观察到竞争或对抗的效果。概述

现已发现一种改良的CE法，它已证明可以有效防治沙门氏菌属和弯曲杆菌属。这一改良，即粘膜竞争性排斥(MCE)，运用了从不带沙门氏菌属及其它家禽病原体的成熟小鸡的盲肠(caeca)中获得的与粘膜相关的菌群的培养物。施用到刚孵化或正孵化小鸡中的MCE的传代培养物已被证实可提供抗两种微生物的实质性保护。当它被适当应用时，MCE处理能致使家禽产物中的沙门氏菌属和弯曲杆菌属两者的存在减少。由于小鸡中减少了肠的带菌体，从而降低了对人类健康的威胁。

根据这个发现，本发明的目的是提供制备粘膜竞争性排斥(MCE)组合物的新方法，该组合物能有效地使家禽免受能在家禽中集群的导致人类肠道疾病的细菌包括沙门氏菌属和弯曲杆菌属的感染。

本发明的另一目的是提供处理家禽以预防被处理鸟类中的这类细菌的感染和生长的新方法。

本发明的其它目的和优点将从下面的描述变得显而易见。本发明的详细描述

新的MCE制剂是一种未确定的组合物，其通过下面方法制备：

(1)从不带沙门氏菌属的鸟类中取下盲肠，用培养基清洗，彻底除去其内任何物质；

(2)在无菌和无氧环境中，或(a)从洗净的盲肠的粘蛋白层得到刮出物，或(b)将洗净的盲肠切片：

(3)将刮出物或切下的盲肠悬浮于无氧的培养基中；和

(4)在无氧环境中培养足够长的时间使其发生繁殖。

然后将得到的含菌群的培养基按需要进行传代培养和扩展，以提供处理步骤所需的足够量的制剂。