[发明专利]报告酶释放技术∶分析天冬氨酸蛋白酶及其它水解酶活性是否存在的方法无效
申请号: | 94192191.3 | 申请日: | 1994-04-13 |
公开(公告)号: | CN1096501C | 公开(公告)日: | 2002-12-18 |
发明(设计)人: | P·J·劳伦斯;A·肖和瑞;T·J·安德烈亚森 | 申请(专利权)人: | 石蕊概念股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34;C12Q1/37 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 林蕴和 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 报告 释放 技术 分析 天冬氨酸 蛋白酶 其它 水解 活性 是否 存在 方法 | ||
1.一种分析在样品中是否存在具有酶活性的水解酶的方法,其特征在于,该方法包括:
(a)将样品与固相载体接触,该固相载体具有固定在其上的报告酶,其固定方式使得一旦受水解酶的作用便会释放出报告酶;
(b)将与所述固相载体接触过的样品与指示剂混合,该指示剂会因报告酶的作用而产生可检测的变化;和
(c)观察指示剂是否发生可检测的变化,可检测的变化便是在样品中存在具有酶活性的水解酶的标志,
其中,所述的报告酶是过氧化物酶。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该水解酶是选自下组的蛋白酶:天冬氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、硫醇蛋白酶、金属蛋白酶、酸性蛋白酶、和碱性蛋白酶。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,该水解酶是天冬氨酸蛋白酶。
4.一种分析在样品中是否存在具有酶活性的水解酶的方法,其特征在于,该方法包括:
将样品置于一个具有第一和第二固相载体的设备中,其中第一固相载体具有固定在其上的报告酶,其固定方式使得一旦受水解酶的作用便会释放出报告酶,第二固相载体并不与第一固相载体接触而且具有固定在其上的指示剂,该指示剂会因报告酶的作用而产生可检测的变化,样品置于设备的方式使得样品与第一和第二固相载体接触,从而任何被样品中存在的水解酶释放出的报告酶能够通过样品而扩散到第二固相载体;和
观察指示剂是否发生可检测的变化,可检测的变化便是在样品中存在具有酶活性的水解酶的标志。
5.一种通过分析在样品中是否存在具有酶活性的天冬氨酸蛋白酶而检测念珠菌病的方法,其特征在于,该方法包括:
(a)将样品与固相载体接触,该固相载体具有固定在其上的报告酶,其固定方式使得一旦受天冬氨酸蛋白酶的作用便会释放出报告酶;
(b)将与固相载体接触过的样品与指示剂混合,该指示剂会因报告酶的作用而产生可检测的变化;和
(c)观察指示剂是否发生可检测的变化,可检测的变化便是在样品中存在具有酶活性的天冬氨酸蛋白酶即具有念珠菌病的标志。
6.一种通过分析在样品中是否存在具有酶活性的硫醇蛋白酶而检测阴道毛滴虫方法,其特征在于,该方法包括:
(a)将样品与固相载体接触,该固相载体具有固定在其上的报告酶,其固定方式使得一旦受到具有酶活性的硫醇蛋白酶的作用便会释放出报告酶;
(b)将与固相载体接触过的样品与指示剂混合,该指示剂会因报告酶的作用而产生可检测的变化;和
(c)观察指示剂是否发生可检测的变化,可检测的变化便是在样品中存在具有酶活性的硫醇蛋白酶即具有阴道毛滴虫的标志。
7.一种分析样品中是否存在靶水解酶的抑制剂的方法,其特征在于,该方法包括:
(a)将样品和靶水解酶置于一个具有第一和第二固相载体的设备中,其中第一固相载体具有固定在其上的报告酶,其固定方式使得一旦受水解酶的作用便会释放出报告酶,第二固相载体并不与第一固相载体接触而且具有固定在其上的指示剂,该指示剂会因报告酶的作用而产生可检测的变化,样品和靶水解酶置于设备的方式使得样品和靶水解酶都与第一和第二固相载体接触,从而从第一固相载体上释放出的报告酶能够通过样品而扩散到第二固相载体;
(b)观察指示剂是否发生可检测的变化,发生可检测的变化便表示在样品中不存在靶水解酶的抑制剂。
8.一种用于分析样品中是否存在具有酶活性的水解酶的测试设备,其特征在于,该设备包括:
至少部分由具有内对表面的、相对的、第一和第二壁界定的容器,内对表面之间有一间隙,第一壁、第二壁或两壁都由透光材料构成;
固定在位于第一和第二壁之一的内对表面上的固相载体上的报告酶,其固定方式使得一旦受到水解酶的作用便会释放出报告酶;
位于第一和第二壁之一的内对表面上的的指示剂,指示剂是受到报告酶的作用时会产生可检测变化的物质;
和容器上用于引入样品的开口。
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