[发明专利]促红细胞生成素类似物组合物和方法

权利要求书

1.一种人促红细胞生成素类似物，含有选自[X³³，Cys¹³⁹]人促红细胞生成素和[X³³.Cys¹³⁹，des-Arg¹⁶⁶]人促红细胞生成素之序列的氨基酸序列，其中X³³选自20种天然存在的氨基酸。

2.根据权利要求1的类似物，它是des-Arg¹⁶⁶。

3.根据权利要求2的类似物，其中X³³是Pro。

4.根据权利要求2的类似物，其中X³³是Cys。

5.一种在序列中含有498个核苷酸之片段或495个核苷酸之片段的双链DNA，所述498个核苷酸之片段编码具有选自[X³³，Cys¹³⁹]人促红细胞生成素之序列的氨基酸序列的人促红细胞生成素类似物，所述495个核苷酸之片段编码具有选自[X³³，Cys¹³⁹，des-Arg¹⁶⁶]人促红细胞生成素之序列的氨基酸序列的人促红细胞生成素类似物，其中X³³选自20种天然存在的氨基酸。

6.根据权利要求5的双链DNA，其中X³³是Pro。

7.根据权利要求5的双链DNA，其中X³³是Cys。

8.根据权利要求6的双链DNA，其中所述片段有498个核苷酸。

9.根据权利要求7的双链DNA，其中所述片段有498个核苷酸。

10.根据权利要求5-9的任一权项的双链DNA，其中所述498或495个核苷酸的片段是两个连续亚片段之一，而另一亚片段编码哺乳动物前原促红细胞生成素之前导肽并与498核苷酸或495核苷酸亚片段相连，以致在由连续亚片段编码的多肽中，前导肽的C末端与促红细胞生成素类似物的N末端相邻。

11.根据权利要求10的双链DNA，其中由编码前导肽之亚片段编码的前导肽具有序列Met Gly Val His Glu Cys Pro Ala Trp LeuTrp Leu Leu Leu Ser Leu X³ Ser Leu Pro Leu Gly Leu Pro ValX⁴ Gly，其中X³选自Leu和Val，并且X⁴选自Leu和Pro。

12.根据权利要求11的双链DNA，其中X³和X⁴分别均是Leu。

13.根据权利要求10的双链DNA，它是在培养的哺乳动物细胞中表达前原促红细胞生成素类似物的表达载体，所述前原促红细胞生成素类似物含有由其C末端与人促红细胞生成素类似物之序列N末端相连的前导肽之序列组成的序列。

14.根据权利要求11的双链DNA，它是在培养的哺乳动物细胞中表达前原促红细胞生成素类似物的表达载体，所述前原促红细胞生成素类似物含有由其C末端与人促红细胞生成素类似物之序列N末端相连的前导肽之序列组成的序列。

15.根据权利要求12的双链DNA，它是在培养的哺乳动物细胞中表达前原促红细胞生成素类似物的表达载体，所述前原促红细胞生成素类似物含有由其C末端与人促红细胞生成素类似物之序列N末端相连的前导肽之序列组成的序列。

16.根据权利要求15的表达载体，由含有一种双链DNA的SV2dhfrSVdeltaSJneo组成，所述双链DNA含有编码前原促红细胞生成素类似物之片段，并且插入于可操作表达前原促红细胞生成素类似物之载体的XbaI位点。

17.表达载体SV2dhfrSVdeltaSJneo([Pro³³，Cys¹³⁹]hEPO)。

18.表达载体SV2dhfrSVdeltaSJneo([Cys¹³⁹]hEPO)。