[发明专利]因子VII衍生的肽

说明书

本发明涉及减小血凝块形成的肽试剂及其组合物。    

血凝集依赖于一系列或者连锁的最终产生纤维蛋白凝块的激活反应。开始，可用两种不同的途径—通过与异常的表面接触(“体内途径”)或通过已知称作“组织因子”或TF的引起脂蛋白分泌的血管外伤(“体外途径”)—来触发引起纤维蛋白形成的连锁反应。本发明主要涉及体外血凝集途径。

TF是一种在很多种类的细胞上都可见到的组成膜蛋白。然而，在组成上表达TF的细胞，例如血管内膜的肌细胞，在正常情况下不暴露到血液中(见Edgington等人，Thromb.Haemostas.66(1)：67—69(1991))。因此可见，体外血凝集途径的开始要求血管壁破裂(见Almus等人，Blood76：354—360(1990))和/或激活表达TF的内皮细胞或单核细胞(见Edwards等人，Blood54：359—370(1979)和Bevilaqua等人，PNAS USA 83：4533—4537(1986))。由于将组织巨噬细胞和平滑肌细胞暴露到血液中的动脉粥样硬化斑的破裂，可引起血管细胞壁的破裂(见Wilcox等人，PNAS USA 86：2839—2843(1989))。在溶栓治疗，移殖手术，机械修复血管未闭或其它类似的操作期间，TF随着损害的进行也暴露到血管中。另一方面，在引起肿块性坏死因子—α或白细胞介素—1产生的脓毒病期间，可以诱导内皮细胞或单核细胞中TF的表达(见Edwards等人，Supra和Gregory等人，J.Clin.Invest.76：2440—2445(1985))。

在体外血凝集途径中，涉及丝氨酸蛋白酶因子VIIa(FVIIa)。通过其它参与凝血过程的物质，包括因子Xa，因子XIIa，因子IXa或凝血酶，对不活跃的酶原因子VII(FVII)进行蛋白水解产生FVIIa。已有报道，当FVII与其辅因子组织因子(TF)结合时，明显促进FVII向FVIIa的激活(见Nemerson，Semin.Hematol.29(3)：170—176(1992))。Yamamoto等人也已经提出FVII向FVIIa的转化可自身催化(见J.Biol.chem.267(27)：19089—19094(1992))。

在钙离子存在下，FVIIa与TF形成复合物并且在经体外途径进行凝血过程的下一步，FVIIa/TF复合物催化因子X转化为它的活泼型—因子Xa。

已有人研究了FVII的结构并且Hagen等人在PNAS USA83：2412—2416(1986)中报道了cDNA序列。FVII是维生素K依赖蛋白并且根据其它类似维生素K依赖蛋白，已在氨基端识别出称作γ—羧基谷氨酸(Gla)区，又根据其它类似维生素K蛋白，要求Gla区与TF结合(见Hagen等人，supra)。要求Gla区接着两个潜在的生长因子(GF)区。然而，文献没提示GF区的任何功能。

已有人提出，血凝块形成体外途径的激活是导致纤维蛋白形成的首要因素(见Weiss等人Blood71：629—635(1 988)和Weiss等人Blood 73：968—975(1989))并因此是冠状动脉粥样硬性损害的发病机理和动脉内膜切除术后再闭塞和再狭窄的关键。然而，能够干涉该途径激活的有效的治疗剂不是可得到的，尽管需要(见Shepard，TIBTECH9：80—85(1991))。

本发明提供抑制FVII或FVIIa与TF缔合的肽和类似物或其盐。通过本发明肽的作用，限制FVIIa/TF复合物的形成并因此减小因子X的激活。

开始用于血凝集治疗的某些肽公开于WO—A—91/07432Board of Regents，The University of Texas System。公开的肽或产生于Gla和第1个GF区之间的区域或产生于FVII或FVIIa的催化区。尽管讨论抑制FVIIa/TF复合物形成，WO—A—91/07432中公开的引起这种作用的那些肽，经过抑制Gla区的功能也发挥抑制作用。因此，这些肽的作用是非专一的，因为其它生理蛋白也有Gla区，例如蛋白C具有与FVII的Gla区接近的同源序列。因此，蛋白C的功能也可能被WO—A—91/07432中公开的肽，以不需要的方式扰乱。