[发明专利]被调节的细胞程序死亡

权利要求书

1.编码嵌合蛋白质的DNA构建体，所说的嵌合蛋白质包括

(a)至少一个能够与所选配体结合的受体区域；和

(b)异源蛋白质区域，在细胞暴露于配体之后，它能启动含有所说嵌合蛋白质的细胞的程序化死亡；

所说配体能够结合两个或更多个嵌合蛋白质分子。

2.根据权利要求1的DNA构建体，其中嵌合蛋白质进一步包括能够将嵌合蛋白质导向预期之细胞对应部分的细胞内靶向区域。

3.根据权利要求2的DNA构建体，其中细胞内靶向区域包括分泌性前导序列、跨膜序列区域、膜结合区域或者指导蛋白质与泡囊或与核联系的序列。

4.根据权利要求1的DNA构建体，其中嵌合蛋白质与所选配体结合的Kd值小于或等于大约10^-6M。

5.根据权利要求1的DNA构建体，其中所选配体的分子量小于约5kDa。

6.根据权利要求1的DNA构建体，其中异源蛋白质区域含有人Fas或人TNFα受体的胞质区域。

7.根据权利要求1-6中任一项的DNA构建体，其中嵌合蛋白质能结合于FK506型配体，环孢菌素A型配体，四环素或类固醇配体。

8.DNA载体，其包含根据权利要求1-7中任何一项的DNA构建体和允许将DNA构建体转染到宿主细胞中并选择含有该构建体之转染体的可选择标志。

9.根据权利要求8的DNA载体，其中载体是病毒载体。

10.根据权利要求9的病毒载体，其为腺病毒载体、腺相关病毒载体或反转录病毒载体。

11.由根据权利要求1-7中任何一项的DNA构建体编码的嵌合蛋白质。

12.含有并能够表达至少一种根据权利要求1-7中任何一项之DNA构建体的细胞。

13.根据权利要求12的细胞，将之与所选配体接触后可变为程序化死亡。

14.根据权利要求12的细胞，其为哺乳动物细胞。

15.根据权利要求13的细胞，其进一步含有：

(a)编码嵌合蛋白质的DNA构建体，其中嵌合蛋白质包括

(i)至少一个能够与第二个所选配体结合的受体区域和

(ii)另一个蛋白区域，它对于所述受体区域来说是异源的，但当在与一个或多个其他相似区域低聚合后能够激发处于对所说的低聚合起反应的转录控制元件之转录控制下的靶基因转录的活化；和

(b)处于对所说的低聚合有反应的转录控制元件之表达控制下的靶基因；

将此细胞暴露于所说第二个所选配体后可表达靶基因。

16.根据权利要求13的细胞，其含有编码下列蛋白质的系列DNA构建体；

(a)含有DNA结合区和至少一个能够与第一个所选配体部分结合的受体区的第一种另外的嵌合蛋白质；和

(b)含有转录激活区和至少一个能够与第二种选择的配体(其可以相同或不同于第一种选择的配体部分)结合之

受体区域的第二种另外的嵌合蛋白质；和以及编码靶基因的第二个DNA构建体，所说的靶基因处于异源转录控制序列的转录控制之下，而所说的转录控制序列与DNA结合区结合并对转录激活区有反应；

所说的细胞在接触到含有选择之配体部分的物质后即表达靶基因。

17.使用能启动根据权利要求13的基因工程细胞程序化死亡的配体以制备消除所说细胞群体的药用组合物的用途，所说的配体具有下列结构式：

          接头-{rbm1，rbm2，…rbmn}其中n是2至大约5的整数，rbm₍₁₎-rbm_(n)是可以相同或不同的并能够与嵌合蛋白质结合的受体结合部分，所说的rbm部分被共价结合到接头部分上，后者则是能够与两个或多个rbm部分共价连接(“-”)的双或多功能分子。

18.根据权利要求17的用途，即使用配体以制备可消除基因工程细胞群体的药用组合物，其中配体具有小于约5kDa的分子量。

19.根据权利要求17的用途，即使用配体以制备可消除基因工程细胞群体的药用组合物，其中配体含有FK506型部分、环孢菌素型部分、类固醇或四环素。