[发明专利]重组的C140受体

说明书

技术领域

本发明涉及一种归属于G-蛋白-偶联受体总类的新发现的受体。该受体在血管的内皮细胞中表达。避免对该受体的作用是限制用于激活该类其它受体的药物的副作用的重要因素。

技术背景

动物对许多治疗性药物和预防性药物的反应是通过位于细胞表面的受体介导的。这样的受体中的一类是G-蛋白-偶联受体，它们的生理作用是通过一种被称为G-蛋白的三亚基蛋白复合物介导的，它与此类型受体结合后释放一个亚基并由此引发附加的细胞内反应。这一亚类的受体还有肾上腺素能的受体，神经肽受体，凝血酶受体和作为本发明主题的C140受体。此类受体的特征在于具有七个将受体固定在细胞表面内的跨膜区。

治疗性药物设计者容易忽略约一个设计目的是在无副作用的情况下引起主体中的需要的反应。所以，被设计成针对例如凝血酶这样的特异受体的药物应该只与凝血酶受体特异地反应而不作用于相关受体。本发明的C140受体可能与调节血管压有关，而该受体的意外地激活或封闭则会产生不可预言的因而是不希望的后果。所以需要预先测定设计成针对例如凝血酶受体的药物会否产生与C140受体反应的副作用。本发明通过提供在简便检测系统中用于产生C140受体的重组材料和用于此检测的活化剂和拮抗剂使预先测定候选药物中是否具有与C140受体反应的副作用成为可能。通常不希望产生该副作用，因为据信，C140受体会对如与外伤和免疫失调有关的丝氨酸蛋白酶之类的酶产生反应。

发明内容

本发明提供了用于确定候选药物产生副作用的倾向性的检测系统的方法和材料。C140受体的分离、重组子产生和鉴定使以该受体为底物并以该受体的活化剂和拮抗剂为检测中的对照剂的检测系统的设计成为可能。

所以，一方面，本发明着重于与C140受体的产生有关的重组材料。它们包括，例如，可被培养以在其表面显示C140受体的转染的细胞，并由此提供一种检测系统检测与天然C140受体能相互作用的物质。通常，可用于此类检测系统的宿主细胞限于那些其表面有合适的受体表达机制并含有作为细胞内反应介体的G-蛋白的细胞。(但是，只测定结合率的系统不需要G-蛋白)。大多数动物细胞合乎这些要求。

另一方面，本发明着重于C140受体的活化剂，它们类似于被活化形式的受体蛋白胞外部分。这些活化剂在上述检测中用作对照剂以检验检测系统的工作能力。另外，C140受体活化剂可在体内表现出降血压作用。所以，活化剂本身可能还可用作抗高血压药物。

再一方面，本发明着重于C140受体的拮抗剂。该拮抗剂由缺乏活化受体所需的必要特性的修饰后的C140受体活化肽构成。这些颉颃剂与受体结合，但不将其活化，由此防止受体被活化剂和天然受体结合配体所激活。

另一组拮抗剂包括被设计成与受体蛋白的特定部分结合的抗体。通常，这是一些对C140受体的任意所希望的区域具有高度特异性的单克隆抗体制剂。本发明的抗体还可用于对受体蛋白的免疫检测，例如，评价基因在重组系统中的成功表达。

还有一方面，本发明涉及使用C140受体来筛选候选药物的活化剂和拮抗剂活性的检测系统。这种检测在确保治疗药剂无C140受体的激活或抑制引起的副作用方面特别有用。在某些情况下，本受体系统中的活化剂活性可能具有治疗用途。在有些这类检测系统中，活化肽被用作正对照。该检测还可用于筛选抑制活化剂作用的拮抗剂。

本发明的另一方面涉及通过在血液或尿液等液体中检测当受体被激活时从C140受体上被切除的肽来进行的对以C140受体被激活为特征的情况的诊断。本发明的另一种诊断方法是利用对激活的受体具有特异性的抗体将一种影印剂定位于激活的受体的原位来目测出被激活的受体。

本发明的其它方面着重于含有本发明的活化剂和颉颃剂的药物复方。本发明的活化剂是抗高血压药；相反的，拮抗剂可在需要时提高血压。

附图简述

图1显示的是小鼠类C140受体的DNA和推导的氨基酸序列。

图2显示的是人C140受体的DNA和推导的氨基酸序列。

图3显示的是人C140受体和鼠C140受体的氨基酸序列之间的比较。

图4显示的是根据推导的氨基酸序列提出的C140受体活化模式。

图5显示的是小鼠C140受体和人凝血酶受体的氨基酸序列之间的比较。

图6显示的是检测小鼠类各种组织中编码C140受体的mRNA的存在的Northern Blot结果。

图7显示的是表明一种C140受体活化剂肽的体内降压作用的血压示踪图。