[发明专利]控制哺乳动物中免疫应答的方法和产品

说明书

本发明涉及表达作为抗原的哺乳动物蛋白质的转基因植物的产品。

本发明进一步涉及抑制或降低一种哺乳动物对口服给药的植物表达作为抗原的哺乳动物蛋白质或这种植物的衍生物的一部分的免疫应答的方法。

发明背景

在自体免疫疾病及移植中进行全身免疫抑制治疗会涉及到感染发病率增加，恶性疾病及许多副作用。引导不用药物的抗原特异性超应答是比较理想的。对经口服的蛋白质的免疫应答是内部调节并引起一种全身超应答状态叫口服耐受[Kay等，(1989)，Immunology，vol.66，pp.416-421；Peng等，(1990)，Clin.exp.Immunol.，vol.81，pp.510-515；Lamount等，(1989)，Immunology vol.66，pp.595-599]。尽管这种现象中包含许多因素，包括可溶性调节子及T抑制细胞，但显然粘膜组织的抗原处理对这种效应是关键的。

不同的研究报道了抗原的经口给药与自体免疫疾病相关，引起口服耐受及预防和减少自体免疫病。

对自体抗原的口服耐受可以减轻实验导致的过敏性脑炎(EAE)、辅药关节炎(AA)、胶原引起的关节炎(CIA)及实验性自体串珠状关节炎(EAU)[Thompson等综述，(1990)，ImmunologyToday，vol.11，pp.396～399).在EAE病中摄食髓磷脂碱性蛋白(MBP)可以改变其严重性，在最近的对多样性硬化病人的临床试验中，接受MBP治疗的病人在试验过程中基本上没有临床加重情况并减少了外周血液中MBP反应T细胞的数目。

在国际专利申请公开号WO 92/07581及Weiner等(1992)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，vol.89，pp.7762-7766中，Weiner等描述了哺乳动物对口服给药脾细胞或供者组织中脾细胞制剂或根据II类主要组织相容性复合体(MHC)蛋白质片段合成的多肽这类异体移植物的应答抑制。

然而，这个方法也有许多问题。首先，在移植过程中外源多肽呈递的复杂性使得筛选对导致耐受合适的多肽序列很困难。

第二，导致对抗原的口服耐受是量效相关的，经口抗原不足会引发肠淋巴细胞并引起相反及麻烦的敏感效应。因此必须获得大量的抗原。

第三，多肽本身的性质会引起增加的而不是减少的免疫应答。

如果整个抗原蛋白质用于引发口服耐受，那将产生一个呈递给免疫系统的引起耐受的多肽的很大的排列。如果诸如MHC蛋白质或其它移植抗原等的抗原复合体作为整个蛋白质使用，那么在体外很难合成足够量的此类蛋白质。

此发明中的方法克服了此类问题，且并没有受到前述参考文献的提示。该方法是在植物中表达合适的哺乳动物抗原，如移植抗原或自体抗原，并在哺乳动物中用这类植物或植物衍生物治疗使之产生针对表达的哺乳动物抗原的口服耐受，从而在哺乳动物中控制或抑制抑制物排斥或自身免疫应答。

转基因植物被用于表达许多单链异原多肽并获得相当成功(Trudel等，4992)，Plant Science，v.87，pp.55-67)。更复杂的多肽链蛋白质如抗体也得以表达，但结果并不稳定。(Swain，W.F.(1991)，Tibtech，v.9，pp.107)。

有人建议在植物中表达病毒抗原，希望能提供″可食疫苗″，在人摄食含有该病毒抗原的植物后能刺激增强免疫反应，并对病毒产生免疫(Mason等，(1992)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，vol.89，pp.11745-11749)。

以前没有参考文献提及在哺乳动物中用表达合适的哺乳动物抗原的植物或其衍生物治疗以减少或抑制哺乳动物的免疫应答。

发明总结

按照本发明的实施方案，构建了新质粒以将编码哺乳动物抗原，如移植抗原或自体抗原的DNA序列引入合适的植物中。

按照本发明的进一步实施方案，提供了新的转基因植物，这种植在其基因组DNA序列中插入了编码哺乳动物抗原如移植抗原或身身抗原的外源DNA序列。该植物能表达标入的DNA序列并产生其编码的蛋白质。

按照本发明的进一步实施方案，提供了一种在哺乳动物中抑制或减少对抗原免疫应答的方法，该方法包括给哺乳动物口服或肠道给予有效剂量的一种植物组织来治疗该植物组织包含了有效浓度的抗原，从转基因植物中获得的这种植物组织在转基因植物的基因组中含有一份可表达抗原的异源基因。