[发明专利]用嵌段共聚物促使酶稳定

说明书

本发明涉及用非离子型的聚合醚-多元醇嵌段共聚物表面活性剂促使酶稳定。

酶通常被配制成为某种特殊工业生产所设计的以水作溶剂的液相酶组合物。然而这种液相酶组合物一直受到诸如化学不稳定性等问题所困扰，这种化学不稳定性导致酶的失活，特别是在贮存过程中的失活。由于贮存而使酶失活这一尖锐问题已经特别地影响到液体清洗工业。

将诸如液相酶组合物这样的工业品在世界各地贮存在各种气候条件下的仓库里是很普遍的现象，这些酶长时间地经受着从零度到高于50℃的温度。在温度从0℃到50℃条件下贮存数月之后，大多数酶由于酶的不稳定性使酶组合物的活性损失了从20％到100％不等。

为了使包含在液相酶组合物中的酶稳定已采取了各种尝试。采用加入醇、甘油、二烷基甘油醚，以及这些化合物与其它化合物的混合物等方法来增加液相酶组合物的稳定性的尝试即使在温和的贮存温度范围内也仅得到了微不足道的成功。

在美国专利4,801,544中，Munk利用了一种乙二醇和乙氧基化的直线醇非离子型表面活性剂与碳氢化合物作溶剂的体系作为稳定剂，并描述了将酶与溶剂/表面活性剂混合后装入胶囊中。水份的含量少于5％，并测定了酶在35°、70°、100°F温度下的稳定性。

在美国专利4,548,727中，Shaer描述了采用一定的酯制成的水相酶的稳定化。作为稳定剂的酯的分子式为RCOOR¹、R为H或C₁-C₃的烷基，R¹为C₁-C₆的烷基。酯在水相酶制剂中的重量百分比为0.1-2.5％。按照该专利的报导，被使用的酶是一种商业化的，以粉末状、液体或膏剂形式出售的酶，其中包括有2％-80％的活性酶，载体是硫酸钠或钙、氯化钠、甘油、非离子型表面活性剂或含上述物质20％到98％的混合物。

Letton等在美国专利4,318,818中描述了一种水相酶组合物稳定体系，该体系含有钙离子和一种低分子量的羧酸或它的盐。稳定体系的PH值从约6.5到约10。

Guilbert等在美国专利4,243,543中描述了含有蛋白水解酶的液态清洗剂组合物的稳定化方法。这种清洗剂组合物通过加入抗氧化剂和一种亲水性的多元醇，同时稳定其PH值来进行稳定化。

Weber在美国专利4,169,817中描述了一种含有稳定化的酶的液体清洗剂组合物。这种组合物是一种水溶液，包含从10％到50％重量的固体和包含清洗剂组分、表面活性剂、从Bacillus Subtilus得到的酶和一种酶稳定剂。这种稳定剂由高水溶性的钠或钾盐和/或水溶性的羟基醇，从而使该溶液可长期贮存而不使酶失活。

Dorrit等在欧洲专利0,352,244 A2中描述了采用两性表面活性剂作为稳定化的液相清洗剂组合物。

Kaminsky等在美国专利4,305,837中描述了含有钙离子和一种低分子羧酸或盐和一种低分子醇作稳定体系的稳定化的水相酶组合物。这种稳定化的酶被用于清洗剂组合物。这种组合物可包括非离子型表面活性剂，其分子式为RA(CH₂CH₂O)_nH，其中R为亲脂残基，A为带有活泼氢原子的一个基团，n代表乙氧残基部分的平均个数。R一般包含约8至约22个碳原子，但能够通过氧化丙烯与低分子量的化合物缩合而形成，而n通常为2-24。所用的低分子量的醇可以是C₁-C₃的一元醇或含2-6个羟基的多元C₂-C₆醇。Kaminsky等注意到多元醇能改善酶的稳定性，它们包括丙二醇、乙二醇和丙三醇。

Tai在美国专利4,404,115中描述了一种水相酶的液体清洗组合物，它包括作为酶稳定剂的碱金属五硼酸盐、任选地含有碱金属亚硫酸盐和/或多元醇。这种多元醇含有2-6个羟基，包括象1，2-二丙醇、乙二醇、赤藓醇、丙三醇、山梨糖醇、甘露糖醇、葡萄糖、果糖、乳糖等的物质。

Boskamp在美国专利4,462,922中也描述了一种水相酶清洗剂组合物，它具有一种稳定剂，它是硼酸或硼酸盐与多元醇或多功能团氨基化合物组成，这种氨基化合物中存在一种还原的碱金属盐。使用了与Kaminsky等专利中的基本相同的多元醇。

本发明的目的是提供一种能克服上述和其它缺点的稳定化酶和稳定化酶组合物的方法。本发明的优点在于提供了一种稳定化酶的方法以及稳定化的酶组合物。