[发明专利]曲霉表达系统

权利要求书

1含有与启动子可操作相连的编码异源蛋白质的核酸序列的日本曲霉型宿主细胞。

2权利要求1的宿主细胞，其中所述蛋白质是真菌蛋白质。

3权利要求2的宿主细胞，其中所述启动子是真菌启动子。

4权利要求2的宿主细胞，其中所述蛋白质的真菌酶。

5权利要求4的宿主细胞，其中所述酶选自过氧化氢酶，漆酶，酚氧化酶，氧化酶，氧化还原酶，纤维素酶，木聚糖酶，过氧化物酶，脂酶，水解酶，酯酶，角质酶，蛋白酶和其他蛋白水解酶，氨肽酶，羧肽酶，植酸酶，裂解酶，果胶酶和其他果胶水解酶，淀粉酶，葡糖淀粉酶，α-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶，α-葡糖苷酶，β-葡糖苷酶，甘露糖苷酶，异构酶，蔗糖酶，转移酶，核糖核酸酶，几丁质酶和脱氧核糖核酸酶。

6权利要求1的宿主细胞，其中还含有选择性标记。

7权利要求6的宿主细胞，其中所述标记选自argB，trpC，pyrG，amdS和hygB。

8权利要求2的宿主细胞，其中所述启动子选自米曲霉TAKA淀粉酶，Rhizomucor miehei天冬氨酸蛋白酶，黑曲霉葡糖淀粉酶，黑曲霉中性α-淀粉酶、黑曲霉酸稳定α-淀粉酶和Rhizomucormiehei脂酶。

9权利要求1的宿主细胞，它是日本曲霉，棘孢曲霉或日本曲霉棘孢变种的成员。

10日本曲霉型宿主细胞，含有编码与真菌启动子和选择性标记可操作相连的异源真菌酶的核酸序列。

11权利要求10的宿主细胞，含有选自脂酶，木聚糖酶和纤维素酶的真菌。

12权利要求10的宿主细胞，其中所述启动子选自来自米曲霉TAKA淀粉酶，Rhizomucor miehei天冬氨酸蛋白酶，黑曲霉葡糖淀粉酶，黑曲霉中性α-淀粉酶，黑曲霉酸稳定α-淀粉酶和Rhizomucor miehei脂酶的启动子。

13权利要求12的宿主细胞，其中所述选择性标记选自argB，trpC，pyrG，amdS和hygB。

14权利要求10的宿主细胞，其中所述宿主细胞是日本曲霉，棘孢曲霉或日本曲霉棘孢变种的成员。

15权利要求10的宿主细胞，其中日本曲霉宿主细胞含有编码与TAKA淀粉酶启动子可操作相连的真菌木聚糖酶的核酸序列，而且还含有amdS或hygB标记。

16权利要求10的宿主细胞，其中日本曲霉棘孢变种宿主细胞含有编码与TAKA淀粉酶启动子或AMG启动子可操作相连的真菌脂酶的核酸序列，而且还含有amdS标记。

17权利要求10的宿主细胞，其中棘孢曲霉宿主细胞含有编码与TAKA淀粉酶启动子可操作相连的真菌脂酶的核酸序列，而且还含有amdS标记。

18生产所需的蛋白质的方法，包括在可以表达所述蛋白质的条件下培养含有编码与启动子可操作相连的异源蛋白质的核酸序列的日本曲霉型宿主细胞，然后从培养液中回收所述蛋白质。

19权利要求18的方法，其中所述蛋白质是真菌蛋白质。

20权利要求18的方法，其中所述启动子是真菌启动子。

21权利要求20的方法，其中所述蛋白质是真菌酶。

22权利要求21的方法，其中所述酶选自过氧化氢酶，漆酶，酚氧化酶，氧化酶，氧化还原酶，纤维素酶，木聚糖酶，过氧化物酶，脂酶，水解酶，酯酶，角质酶，蛋白酶和其他蛋白水解酶，氨肽酶，羧肽酶，植酸酶，裂解酶，果胶酶和其他果胶水解酶，淀粉酶，葡糖淀粉酶，α-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶，α-葡糖苷酶，β-葡糖苷酶，甘露糖苷酶，异构酶，蔗糖酶，转移酶，核糖核酸酶，几丁质酶和脱氧核糖核酸酶。

23权利要求18的方法，还包括一选择性标记。

24权利要求23的方法，其中所述标记选自argB，trpC，pyrG，amdS和hygB。