[发明专利]制备型等电点电泳分离方法及设备无效
申请号: | 95101184.7 | 申请日: | 1995-01-20 |
公开(公告)号: | CN1051245C | 公开(公告)日: | 2000-04-12 |
发明(设计)人: | 朱德权;丁富新;袁乃驹;刘铮;黄正;张春洁 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | B01D57/02 | 分类号: | B01D57/02 |
代理公司: | 清华大学专利事务所 | 代理人: | 王兵 |
地址: | 10008*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 电泳 分离 方法 设备 | ||
1、一种用于制备型的等电点电泳分离的电泳槽,其特征是在电泳槽的腔室体内,垂直设置两个窄长的电极;在所述的两个电极之间,沿电极长度方向平行设置凝胶膜;所述的凝胶膜将所述电极之间的空间分隔成几个相互平行的腔室,中间的腔室为分离室,在分离室内,通入pH值调至目标蛋白质的等电点的待分离样品液;在分离室的两侧为冲洗室,在冲洗室内,通入pH值等于目标蛋白质等电点且电导小的缓冲液;在所述的两电极之间,加载恒定的直流电压,电极所在的腔室,为阴(阳)极室。
2、按权利要求1的电泳槽,其特征是在凝胶膜的外侧,设置离子交换膜,从而将电极之间的空间分隔成相互平行的腔室,中间腔室为分离室,与分离室相邻的两个腔室为冲洗室,靠近电极的两个腔室为电极室(阴或阳极室)。
3、按权利要求1或2的电泳槽,其特征是所述的凝胶膜为2~4张,其每张的厚度为0.2~2毫米。
4、按权利要求2的电泳槽,其特征是等离子交换膜为阴离子交换膜和/或阳离子交换膜。
5、按权利要求1或2的电泳槽,其特征是腔室为3~5个。
6、一种制备型的等电点电泳分离方法,其特征是利用权利要求1~4之一的电泳槽,该方法包括如下步骤:
(1)将pH值调至目标蛋白质的等电点的待分离样品液通入分离室;
(2)将pH值等于目标样品蛋白质等电点且电导小的缓冲液通入冲洗室;
(3)将电极液通入电极室内;
(4)两电极之间加载恒定的直流电压。
7、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷—甘氨酸、三羟甲基氨基甲烷—醋酸、醋酸—醋酸钠溶液的一种。
8、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是通入分离室的待分离样品液的流速为100~1000ml/分。
9、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是通入冲洗室的缓冲液的流速为200~2000ml/分。
10、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是缓冲液的浓度为0.005~0.1摩尔/升。
11、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是施加于电极间的电压为20~500伏,电流强度为小于100毫安。
12、按权利要求6的分离方法,其特征是样品液为含牛血红蛋白、牛血清蛋白的液体。
13、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是样品液是经过粗分的白细胞介素-6包函体破碎液,其中白细胞介素-6含量为约0.22克/毫升。
14、按权利要求6的电泳分离方法,其特征是样品液为尿激酶半精品,其比活为4000活力单位/毫克蛋白。
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