[发明专利]结晶白细胞介素-4

说明书

由T细胞产生的自细胞介素—4(IL—4)最初被描述为一种能辅助刺激活化B细胞增殖的鼠型因子(Howard等，J.Exp.Med.155：914，1982)。随后证实，鼠型IL—4能够对B细胞(Paul等，Ann.Rev.Immunol.5：429，1987；Noelle等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81：6149，1984；Roehm等，J.Exp.Med.160：679，1984；Vitetta等，J.Exp.Med.162：1726，1985；Coffman等，

Immunol.136：4538，1986；Coffman等，J.Immunol.136：949，1986)及包括T细胞(Mosmann等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83：5654，1986；Fernandez-Botran等，J. Exp.Med.164：580，1986；Hu—Li等，J.Exp.Med.165：157，1987；Grabstein等，J.Immunol.139：1148，1987；Zlotnick等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84：3856，1987)、造血母细胞(Rennick等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84：6889，1987；Peschel等，Blood70：254，1987)和肥大细胞(Mosmann，同上)在内的其它细胞类型产生多种生物学效应。

根据鼠型IL—4的同源性，已克隆出了编码人白细胞介素—4(huIL—4)的cDNA(Yokota等，Proc.Natl.Acad。Sci.USA83：5894，1986)，并在哺乳动物宿主(Le等，J.Biol.Chem.263：10817，1988；Sonoda等，J.Biotechnology 9：61，1988；Takebe等，Mol.Cell Biol.8：466，1988)和细菌宿主(Van Kimmenade等，Eur.J.Biochem.173：109，1988)中进行了表达。和鼠型IL—4一样，重组huIL—4(rhuIL-4)也是一种对多种细胞类型有作用的多效性淋巴细胞活素。例如，rhuIL—4能够诱导活化T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖(Spits等，J.Immunol.189：1142，1987；DeFrance等，J.Immunol.139：1135，1987)，增强II类主要组织相容性抗原和B细胞上IgE的低亲和性受体的表达(Rousset等，J.Immunol.140：2625，1988；DeFrance等，J.Exp.Med.165：1459，1987)，诱导IgE和其它免疫球蛋白的产生(Pene等，Proc.Natl.Acad.Sci USA 85：6880，1988)。rhuIL—4能够抑制B细胞来源的慢性淋巴细胞性白血病细胞的IL—2依赖性增殖，这提示它可临床应用于B细胞肿瘤(Karray等，J.Exp.Med.168：85，1988)。

毫克量纯化rhuIL—4的可得性促进了有关该蛋白质的结构和结构—功能关系研究的开展。本发明涉及结晶rhuIL—4产生条件的发现。本发明进一步涉及结晶rhuIL—4本身。该晶体适于进行X射线衍射研究，并可应用于rhuIL—4的纯化和配制。

本发明就其最宽的方面而言，涉及结晶形式的白细胞介素—4。

本发明进一步涉及结晶形式的人白细胞介素—4。

本发明进一步涉及结晶形式的、用重组DNA技术产生的人白细胞介素—4。

本发明进一步涉及可能是糖基化的或非糖基化的、结晶形式的白细胞介素—4。

本发明进一步涉及一种产生白细胞介素—4晶体的方法，该方法包括，从含有硫酸盐或柠檬酸盐的pH5—7缓冲水溶液中结晶出白细胞介素—4。

本发明的结晶白细胞介素—4可用于X射线晶体学分析，还可用于制备用于治疗对白细胞介素—4治疗敏感的任何医学症状的药物组合物。