[发明专利]一种抗肿瘤抗生素云南霉素及其制备方法

说明书

本发明属于具有抗肿瘤作用的胞嘧啶核苷二肽抗生素。

迄今已发现的来源于微生物的抗生素已近万余种之多，其中许多已作为医药，农药等得到了广泛应用，但疗效好、毒性低的抗肿瘤抗生素仍为数甚少。因此进一步寻找理想的抗肿瘤作用的新品种仍日趋迫切。

本发明是在从云南放线菌筛选抗肿瘤抗生素的过程中，由链霉菌菌株2321的培养液中分离到具有抗肿瘤及抗菌作用的活性物质，从该物质的酸水产物中分离得到了具有抗肿瘤作用的抗生素云南霉素(Yunnanmycin)。(该云南霉素的产生菌已保藏在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，北京中关村。100080，保藏日期1995年，7月26日，编号链霉菌CGMCCNO.0234)。

经光谱及质谱数据分析，确定云南霉素具有如式(1)R＝H所示结构式，该结构式可将云南霉素与迄今已知的胞嘧啶核苷二肽结构的所有医用和农用抗生素如谷氏菌素(Gougerotin)庆丰霉素(Qingfengmycin)及宁南霉素(Ningnanmycin)等相区别，定名为云南霉素。式中R为H或K或Na。本发明的内容与要点如下：一、云南霉素的产生菌、发酵、抗菌活性及制造方法1.产生菌来源：云南关坪自然保护区土壤。形态特征：孢子丝螺旋形。孢子呈多型性：椭圆形、园形、瓜子形，孢子表面有刺。

培养特征：见表1表1培养基            生长  产生菌丝     基内菌丝       可溶性色素Isp.1号培养基      好    白色        无色             微黄Isp.2号培养基      好    白至褐灰    无色             无Isp.3号培养基      适度  白至褐灰    无色至微灰       无Isp.4号培养基      好    白至褐灰    无色至微灰       无Isp.5号培养基      好    白至褐灰    无色至乳脂       微黄Isp.6号培养基      好    白色        无色             无H₂SIsp.7号培养基      好    浅灰        软皮色           污黄葡萄糖天门冬素琼脂 适度  浅灰        无色             无蔗糖查氏琼脂       差    褐灰        无色             无葡萄糖查氏琼脂     好    褐          浅黄灰斑         浅黄甘油查氏琼脂       好    白至浅灰    浅黄褐           污黄高氏1号琼脂        适度  灰白至灰    无色或乳脂       无或淡黄不形成黑色素，不产生H₂S。2.发酵孢子传代培养：Isp.5号培养基，28℃10天培养。种子培养：培养基成分：葡萄糖1％，淀粉1.5％，肉膏0.5％，胨(鱼)0.5％，NaCl0.3％，黄豆粉1％，无盐水，PH7.0，28℃振荡培养48小时。发酵培养：培养基成分：葡萄糖2％，淀粉1％，肉膏0.5％，酵母粉0.5％，胨(鱼)0.5％，NaCl0.3％，黄豆粉1％，无盐水，PH7.0，28℃振荡培养96小时。活性检定：检定菌：大肠杆菌B培养基：肉膏0.3％，胨1％，琼脂1.5％，无盐水，PH7.0-7.2。检定方法：纸碟法。3.抗菌活性云南霉素只对大肠杆菌B有较弱的活性。纸碟法检测结果见表2表2

试验菌                     最低抑制浓度(ug/ml)

Bacillus subtilis 6633        ＞500

Staphylococcus aureus 209p    ＞500

Sarcina lutea                 ＞500

Escherichia coli B              500

Escherichia coli o11          ＞500

Proteus vulgaris ox19         ＞500

Pseudomonas aeruginosa 11     ＞500

Klebsiella pneumoniae         ＞500

Candida albicans              ＞500

Penecillium avellaneum 5404   ＞5004.制造方法