[发明专利]流感疫苗

权利要求书

1.基本分离的重组神经氨酸酶，其特征在于，它通过如下制取：

a)将用神经氨酸酶表达载体转化或用神经氨酸酶表达载体转化的病毒感染的宿主细胞培养在合适的培养基中，其中的表达载体至少含有流感病毒神经氨酸酶基因编码区减去膜锚着点编码区后的部分区段或其修饰形式，在同相位前面有一段信号序列；

b)从培养基中分离出表达产物神经氨酸酶。

2.基本分离的重组流感NA2神经氨酸酶，其特征在于，它通过如下制取：将用病毒感染的宿主细胞培养在合适的培养基中，该病毒通过重组表达质粒pAc2IVNAs(LMBP 2976)与其基因组的双同源重组而被转化。然后从培养基中分离出神经氨酸酶表达产物。

3.重组的流感NA2神经氨酸酶，其特征在于，它通过如下制取：将用重组表达载体pPP1VNAfls(LMBP 3223)转染的宿主细胞培养在合适的培养基中，然后可选地从培养基中分离出神经氨酸酶表达产物。

4.根据权利要求1、2或3所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，宿主细胞来自某种低级真核生物。

5.根据权利要求1、2或4所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，宿主细胞是昆虫细胞。

6.根据权利要求5所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，昆虫细胞是Sf9昆虫细胞。

7.根据权利要求1、3或4所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，宿主细胞是酵母细胞。

8.根据权利要求1至7所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，它用于抗流感疫苗中。

9.根据权利要求2至7中任一项所述的重组流感神经氨酸酶，其特征在于，它用于抗NA2型流感疫苗中。

10.表达可分泌流感神经氨酸酶的载体，其特征在于，它具有：

a)至少流感神经氨酸酶基因编码区减去膜锚着点编码区后的部分区段，或其修饰形式；

b)同相位偶联于编码区5’端的信号序列；

c)位于信号序列5’端的一个启动子；

d)位于编码区3’端的一个转录终止子。

11.表达可分泌的NA2流感神经氨酸酶的载体，其特征在于，它具有：

a)A/Victoria/3/75病毒株的流感NA2神经氨酸酶基因编码区减去膜锚着点编码区后的区段或其修饰形式；

b)同相位偶联于编码区5’端的信号序列；

c)位于信号序列5’端的一个启动子；

d)位于编码区3’端的转录终止子。

12.根据权利要求10或11所述的载体，其特征在于，信号序列源自流感NA2病毒A/victoria/3/75(H3N2)的血凝素基因。

13.根据权利要求10、11或12所述的载体，其特征在于，启动子是多角体蛋白启动子。

14.根据权利要求10至13中任一项所述的载体，其特征在于，转录终止子源自SV40和/或多角体蛋白基因。

15.保藏号为LMBP 2976的载体pAc2IVNAs。

16.在酵母中表达可分泌流感神经氨酸酶的载体，其特征在于，它具有：

a)流感神经氨酸酶基因编码区减去分别编码神经氨酸酶的膜锚着点编码区和至少部分茎区的区域后的区段或其修饰形式；

b)同相位偶联于编码区5’端的信号序列；

c)位于信号序列5’端的一个启动子；

d)位于编码区3’端的转录终止子。

17.在酵母中表达可分泌的流感NA2神经氨酸酶的载体，其特征在于，它具有：

a)A/Victoria/3/75病毒株的流感神经氨酸酶基因编码区减去分别编码神经氨酸酶的膜锚着点编码区和至少部分茎区的区域后的区段或其修饰形式；

b)同相位偶联于编码区5’端的信号序列；

c)位于信号序列5’端的一个启动子；

d)位于编码区3’端的转录终止子。

18.根据权利要求16或17所述的载体，其特征在于，信号序列是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α因子的早前信号序列。