[发明专利]前列腺素E受体

说明书

发明领域

这项发明涉及一种前列腺素E(PGE)受体。更具体而言，它涉及一种人或大鼠的前列腺素E受体多肽，一种制备该多肽的方法，编码所说多肽的DNA，由所说DNA组成的复制或表达载体，由所说载体转染或转化的宿主细胞，所说多肽的单克隆或多克隆抗体，一种包含所说多肽或抗体的药用组合物，以及一种用所说多肽或宿主细胞筛选一种具有前列腺素E激动或拮抗活性的化合物的方法。

背景技术

前列腺素类物质例如前列腺素(PG)，凝血氧烷(TX)，和白细胞三烯(LT)都是花生四烯酸氧化代谢物家族的，为了维护局部组织内的稳态而表现出各种生理活性(见治疗的药理基础(Gilman，A.G.，Goodman，L.S.，Rall，T.W.，and Murad，F.，eds)7th Ed.，pp660，Macmillan  Publishing Co.，New York(1985))。它们的生理活性由细胞膜上每一种前列腺素类物质特异性受体所控制(见药理学与毒理学年评，10，213(1989)和《综合医药化学》‘前列腺素及它们的受体’，pp643(1990)，Pergamon  Press，Oxford)。

前列腺素E是前列腺素类物质中的一种，尤其是前列腺素E₂(PGE₂)参与消化道的收缩和舒张，胃酸的分泌，平滑肌的舒张和神经递质的释放等等。从前列腺素E₂生理活性、药用活性以及作用位点的分析中，可以认为前列腺素E₂受体有三种亚型，即EP₁、EP₂和EP₃，每一亚型涉及不同的细胞内信号传导。这三种亚型都可以诱导磷脂酶C的活化和腺苷酸环化酶的激活或抑制。(见药理学和毒理学年评，10，213(1989)和《综合医药化学》‘前列腺素及它们的受体’，pp643(1990)，PergamonPress，Oxford)。

前列腺素E₂受体中的一种EP₂，据认为参与了支气管平滑肌或回肠环形平滑肌的舒张，各种血管的扩张以及钠和水在肾管中的重新吸收。(见英国药理杂志，87，45(1986)；英国药理杂志，105，271(1992)；J.Clin.Invest.，47，1154(1968)and J.Biol.Chem.，263，6155(l988))。此外，前列腺素E₂通过EP₂受体产生一种重要作用是抑制免疫系统和炎症(见Am.Rev.Respir.Dis.，135，72(1987))。另外，前列腺素E₂可以通过EP₃受体产生作用，据认为此作用对防止和/或治疗下列疾病有效，例如腹泻，消化道溃疡，高血压，哮喘，免疫疾病或炎症。为了证实这几点，有必要对EP₂受体的结构、信号传导以及分布做出分析。

发明内容

近来，本发明的发明人已成功地克隆了小鼠前列腺素E受体三种亚型的cDNA，即EP₁、EP₂和EP₃(见Biochem.Biophys.Res.Commun.，184，1197(1992)；J.Biol.Chem.，268，20175(1993)；J.Biol.Chem.，268，7759(1993)和J.Biol.Chem.，267，6463(1992))。此外，在日本专利申请Kokai Hei 5-320199的说明书中，本发明的某些发明人也被列为发明人，一种小鼠和一种人的前列腺素E受体被提及。然而，就人的前列腺素E受体而言，尚未进行特定的序列分析，无论是核苷酸序列或氨基酸序列都未出示。

另外，An等人在Biocnem.Biophys.Res.Commun.，197，263，(1993)中，有关于克隆人EP₂受体cDNA以及它的表达的说明，也出示了推测的氨基酸序列。另外，相应的核苷酸序列也已在Genbank中登记，登记号L25124。然而，详尽的调查发现，本发明中人EP₂受体与An等人的EP₂受体在核苷酸序列中有八个差异，在氨基酸序列中有三处差异。

用编码小鼠EP₂受体的cDNA或它的片段做为探针，本发明人在人和大鼠的cDNA文库中进行同源插寻，从分离的克隆测序和表达的结果来看，得到了一种人和一种大鼠的EP₂受体的克隆，这样本发明即完成了。