[发明专利]胸苷激酶突变体无效

专利信息
申请号: 95193717.0 申请日: 1995-05-02
公开(公告)号: CN1151186A 公开(公告)日: 1997-06-04
发明(设计)人: L·A·罗布;M·E·布莱克 申请(专利权)人: 华盛顿大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N15/86;C12N9/12;A61K48/00
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 代理人: 李瑛
地址: 美国*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 激酶 突变体
【权利要求书】:

1.一种编码包含一个或多个突变的Herpesviridae胸苷激酶的分离的核酸分子,至少一个所说的突变是一个DRH核苷结合位点下游的5位氨基酸取代,这种取代增加所说胸苷激酶的生物学活性(与未突变的胸苷激酶比较)。

2.按照权利要求1的编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,其中蛋氨酸或酪氨酸取代所说DRH核苷结合位点下游的5位氨基酸。

3.按照权利要求1的编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,进一步包含缬氨酸取代所说DRH核苷结合位点下游的4位氨基酸。

4.按照权利要求1的编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,进一步包含半胱氨酸取代所说DRH核苷结合位点下游的6位氨基酸。

5.一种编码包含一个或多个突变的Herpesviridae胸苷激酶的分离的核酸分子,至少一个所说的突变是半胱氨酸取代一个DRH核苷结合位点下游的6位氨基酸,这种取代增加所说胸苷激酶的生物学活性(与未突变的胸苷激酶比较)。

6.一种编码包含至少四个突变的Herpesviridae胸苷激酶的分离的核酸分子,这种突变增加所说胸苷激酶的生物学活性(与未突变的胸苷激酶比较),所说突变包括一个DRH核苷结合位点上游的2位氨基酸突变成亮氨酸、所说DRH核苷结合位点上游的1位氨基酸突变成亮氨酸、所说DRH核苷结合位点下游的4位氨基酸突变成缬氨酸、所说DRH核苷结合位点下游的5位氨基酸突变成蛋氨酸。

7.一种编码包含至少四个突变的Herpesviridae胸苷激酶的分离的核酸分子,这种取代增加所说胸苷激酶的生物学活性(与未突变的胸苷激酶比较),所说突变包括一个DRH核苷结合位点上游的1位氨基酸突变成亮氨酸、所说DRH核苷结合位点下游的4位氨基酸突变成缬氨酸、所说DRH核苷结合位点下游的5位氨基酸突变成酪氨酸。所说DRH核苷结合位点下游的6位氨基酸突变成半胱氨酸。

8.按照权利要求1-7之任一编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,其中所说的胸苷激酶选自单纯疱疹病毒1型胸苷激酶和单纯疱疹病毒2型胸苷激酶。

9.按照权利要求1-7之任一编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,其中所说的酶是截短的或者包含符合读框的缺失。

10.按照权利要求1-7之任一编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,其中所说的胸苷激酶能够磷酸化核苷类似物,其磷酸化核苷类似物的能力至少超过野生型胸苷激酶的一倍。

11.按照权利要求10的分离的核酸分子,其中所说的核苷类似物选自下列物质:ganciclovir、无环鸟苷、三氟胸苷、1-[2-脱氧,2-氟,(-D-阿糖呋喃基]-5-碘尿嘧碇、ara-A、araT 1-(-D-阿糖呋喃氧基胸腺嘧啶、5-乙基-2′-脱氧尿苷、5-碘代-5′-氨基-2,5′-二脱氧尿苷、碘苷、AZT、AIU、二脱氧胞苷和AraC。

12.按照权利要求1-7之任一编码一种胸苷激酶的分离的核酸分子,其中所说的胸苷激酶能够磷酸化核苷类似物,并且其中 Z > [ ( TKmNAp ) / ( TKmTp ) ( TKwtNAp ) / ( TKwtTp ) ] ]]>式中TKmNAp是胸苷激酶突变体引起的核苷类似物磷酸化率,TKmTp是胸苷激酶突变体引起的胸苷激酶磷酸化率,TKwtNAp是未突变的胸苷激酶引起的核苷类似物磷酸化率,TKwtTp是未突变的胸苷激酶引起的胸苷激酶磷酸化率,Z选自1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5和5。

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