[发明专利]由金属络合物和寡核苷酸制备的共轭物

权利要求书

1.包括寡核苷酸残基N和n个取代基(B-K)的寡核苷酸共轭物，其中B代表与寡核苷酸残基连接的直接键或连接成分，而K表示放射性金属同位素(或稳定性同位素)的络合剂或络合物，所述稳定性同位素，

--可被外部辐射作用转化成放射性同位素，

--可将外部的辐射转化成不同质量、不同能量和/或不同波长的辐射线，其中元素的原子数是5、21-29、31、39、42-44、49、57-83或85，其特征在于寡核苷酸基团N显示了修饰作用，其能阻止或至少显著地抑制由天然存在的核酸酶引起的降解作用。

2.根据权利要求1的化合物，其中的化合物具有通式(I)

N-(B-K)n其中N是寡核苷酸，能以高结合亲和力与其它靶结构特异性结合，并具有显著降低天然存在的核酸酶所致的降解作用的修饰作用，

B是在N和K之间产生连接作用的化学键或连接组分；

K是络合配体，它能够表现出信号发射或治疗活性成分；

n是1至10之间的数字。

3.根据权利要求1或2的化合物，其中的N是具有5-200个核苷酸的寡核苷酸，其中：

a)糖单位的2′位置可以彼此无关地为下列基团：

OR基，其中：R表示具有1-20个碳原子的烷基，其可选择性地含有最多2个羟基，并可选择性地插入1-5个氧原子，氢原子，羟基，氟原子，胺基团，氨基，

而且，存在于3′和5′末端位置上的羟基可以彼此独立地、可选择性地被R基醚化，和/或

b)可以选择性地用作核苷酸间键的磷酸二酯彼此独立地可以被硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯或烷基膦酸酯取代，优选的是膦酸甲酯，和/或

c)3′和5′位的末端基团彼此由b)中所述的核苷酸间键以分子间的方式连接，和/或

d)它含有b)中所述的核苷酸间键，连接3′-3′位或5′-5′位，和/或

e)含有如b)所述的磷酸二酯键，由存在于3位上的C₂-C₂₀羟烷基分别酯样地连接两个胸苷，或者是将类似取代的胸苷基团酯样地与2′位或3′位或5′位上另一个糖的羟基连接，和/或

f)3′位和5′位的末端基团含有如b)所述可选择性修饰的核苷酸间键。

4.根据权利要求3的化合物，其中的寡核苷酸N包括15-100个核苷酸。

5.根据权利要求1-4之一的化合物，其中N代表寡核苷酸，能以高结合亲和力与其它靶结构特异性结合，并能够通过使随机序列之寡核苷酸混合物与所述靶结构一起接触来获得，某些寡核苷酸与所述寡核苷酸混合物相比表现出与靶结构的亲和力增强，将后者从寡核苷酸混合物剩余物中分离出来，然后扩增具有增强了与靶结构的亲和力的寡核苷酸，以获得显示结合在靶结构上寡核苷酸的增加部分的寡核苷酸混合物。

6.如权利要求1-5之一所述的化合物，其中N为寡核苷酸，可以高结合亲和力与靶结构特异性结合，并能够经下述步骤获得：

a)首先，经化学合成法产生DNA链，使得该DNA链在3′端具有一段限定的序列，其与RNA聚合酶的启动子互补，并同时与聚合酶链反应(PCR)的引物互补；并且还使得该DNA链在5′端具有一段限定的序列，其与聚合酶链反应的引物序列互补，而被限定序列之间的序列含有一段随机序列，而且

b)该DNA链在RNA聚合酶的帮助下以互补的RNA链转录，并向聚合酶提供核苷酸，其在核糖单位的2′位上被修饰，而且

c)使如此产生的RNA寡核苷酸与其上欲特异性结合寡核苷酸的靶结构一起接触，并且

d)将那些已经结合于靶结构上的寡核苷酸首先与靶结构一起从未结合的寡核苷酸分开，然后再将结合的寡核苷酸与靶结构分开，并且

e)将这些靶结构特异性的RNA寡核苷酸在反转录酶的帮助下以互补的DNA链转录，并且

f)利用所定义的引物序列以聚合酶链反应扩增这些DNA链，并且

g)然后将以这种方式扩增的DNA寡核苷酸在RNA聚合酶的帮助下并以RNA寡核苷酸中修饰的核苷酸再次转录，并且

h)上述的选择步骤c)-g)可以选择性地进行重复，通常直至以与靶结构有高结合亲和力为特征的寡核苷酸能被充分地选择，然后，对如此所得的寡核苷酸序列可选择性地进行测序。