[发明专利]一种进行磁循环反应的装置无效
申请号: | 95197573.0 | 申请日: | 1995-12-08 |
公开(公告)号: | CN1175282A | 公开(公告)日: | 1998-03-04 |
发明(设计)人: | 亚里克·梅恩;斯蒂芬·G·基弗-希金斯 | 申请(专利权)人: | 盖默拉生物科学公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;B03C1/28;B01J19/00 |
代理公司: | 柳沈知识产权律师事务所 | 代理人: | 巫肖南 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 进行 循环 反应 装置 | ||
1.一种进行磁循环反应的装置,该装置包括以下元件的组合:
(a)一个恒温样品元件,其包括一个具有一组多个样品管槽的平板,以及用来控制样品元件的温度的装置,其中,一些磁循环反应样品管装在样品管槽里;
(b)第一磁元件,其中,该第一磁元件位于样品元件的上方并与之接近,其中该第一磁元件包括一组多个线圈,其中这些线圈包括有多匝围绕软铁心的导电金属丝,并且其中通过组成线圈的金属丝的电流产生围绕第一磁元件的磁场;
(c)第二磁元件,其中该第二磁元件位于样品元件下方并与之接近,其中该第二磁元件包括有一组多个线圈,其中这些线圈包括有多匝围绕软铁心的导电金属丝,并且其中通过组成线圈的金属丝的电流产生围绕该第二磁元件的磁场;
(d)一个控制器,其包括一个微处理器,其中该控制器被操作地连接到恒温样品元件以及第一和第二磁元件的每一元件上,其中该控制器还被操作地连接到一个用户界面上,并且该控制器控制流过每个磁元件的电流和恒温样品元件的温度;
(e)一个电源,其被操作地连接到控制器上,并且对该装置供电。
2.一种应用权利要求1的装置进行磁循环反应来扩增特异DNA片段的方法,该方法包括:
(a)将固相引物结合到一条与靶核酸互补的核酸链中,产生了结合于靶核酸上的固相链;
(b)分离固相链和靶核酸;
(c)将磁性引物结合到与固相链互补的核酸链中,产生具有一条固相链和一条磁性链的双螺旋;
(d)通过在权利要求1的装置的第一磁元件中产生磁场,施加场强足以分开双螺旋的电磁场来将固相链和磁性链分开;
(e)通过在权利要求1的装置的第二磁元件中产生磁场来施加电磁场,使与固相链互补的磁性引物与固相链退火,并使与磁性链互补的固相引物与磁性链退火;
(f)用合适的DNA聚合酶来延伸退火的引物;以及
(g)将步骤(d)-(f)重复必需的次数来获得所需量的扩增的DNA。
3.一种用权利要求1的装置扩增特异单链靶核酸的方法,该方法包括以下步骤:
(a)把磁性引物结合到与靶核酸互补的核酸链中,产生与靶核酸结合的磁性链;
(b)把磁性链与靶核酸分开;
(c)把固相引物结合到与磁性链互补的核酸链中,产生有一条固相链和一条磁性链的双螺旋;
(d)通过在权利要求1的装置的第一磁元件中产生磁场施加场强足以分离双螺旋的电磁场,来将固相链和磁性链分离;
(e)通过在权利要求1的装置的第二磁元件中产生磁场,来使与固相链互补的磁性引物与固相链退火,并使与磁性链互补的固相引物与磁性链退火;
(f)用合适的DNA聚合酶使退火的引物延伸;以及
(g)将步骤(d)-(f)重复必需的次数,来获得所需量的扩增DNA。
4.一种用权利要求1的装置扩散特异双链靶核酸的方法,该方法包括以下步骤:
(a)将靶核酸链分开,产生第一链和第二链;
(b)把固相引物结合到与第一链互补的链中,产生有第一链和固相链的第一异源双链,并将磁性引物结合到与第二链互补的链中,产生具有第二链和磁性链的第二异源双链;
(c)分开第一异源双链和第二异源双链的链;
(d)使与固相链互补的磁性引物与固相链退火,并使与磁性链互补的固相引物与磁性链退火;
(f)用合适的DNA聚合酶使退火的引物延伸;并且
(g)通过在权利要求1的装置的第一磁元件中产生磁场施加场强足以分开双螺旋的电磁场,将固相链与磁性链分开;
(h)通过在权利要求1的装置的第二磁元件中产生磁场,使与固相链互补的磁性引物与固相链退火,并使与磁性链互补的固相链与磁性链退火;
(i)用合适的DNA聚合酶来使退火的引物延伸;
并且
(j)将步骤(g)-(i)重复必需的次数,来获得所需量的扩增的DNA。
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