[发明专利]一种用于微生物肥料的浓缩菌种粉及其制造方法和应用

说明书

本发明涉及一种新型微生物肥料菌种剂制造方法的新工艺。更具体地说，本发明涉及一种将含有固氮芽孢菌的新型微生物肥料菌种剂制成浓缩干燥的芽孢粉的新工艺和新方法。

在前一项发明专利《固氮芽孢菌肥及其制造方法》(专利申请号95117432·0)申请书中，采用下述一种含有固氮芽孢菌的新型微生物肥料及其制造方法：(a)选用国内新分离出特有的能产生芽孢的固氮芽孢菌种(Bacillus azotofixans)及已知的产芽孢的磷细菌和钾细菌菌种，在发酵罐中大量发酵培养形成芽孢；(b)将三种发酵菌液与经过杀菌处理的生活污泥及禽畜粪等有机物基质按一定比例混合，在机械设备中制造成圆球形颗粒；(c)经60～80℃烘干后，制成含有大量固氮菌、磷细菌及钾细菌芽孢的微生物有机复合生物肥料。此法的优点是能制造出含有芽孢的固氮菌、磷细菌和钾细菌颗粒肥料，可耐高温干燥和贮存。但不足之处是所有菌种发酵液只宜在本厂自产自用，经发酵培养的菌种液体积大，难于包装运输到其它菌肥厂和当地有机肥原料混合加工成颗粒菌肥；而各地乡镇企业要生产此种菌肥，势必都要自行建立菌种厂发酵生产菌种。如此，则需成倍增加各地同类生物肥料厂的设备投资和技术力量，而在乡镇企业资金不足和发酵技术人员缺乏情况下，如无菌种来源势必影响到复合生物肥料的发展和推广应用。

鉴于上述现有技术存在不足之处，本发明更进一步研究改进菌种制造方法，将菌种发酵液浓缩干燥成干菌种粉，其目的在于提供一种最经济有效的能将固氮芽孢菌、磷细菌和钾细菌菌种发酵液加工浓缩制成含有高浓度(每克含芽孢100亿个)芽孢菌种粉的制作方法。浓缩加工制成的芽孢菌种粉可长期贮存备用：(1)供本厂周年自用作为扩制颗粒菌肥的菌种；(2)经包装运输到各地乡镇企业生物肥料厂加工扩制成颗粒菌肥之用，各地同类企业不需另投资建立菌种厂；(3)用作为菌肥拌种剂，每亩只用20克干菌粉，含有效菌2000亿个，比现有各地推广应用的草炭菌肥拌种剂每亩用量0.5～1公斤(含菌500～1000亿个)用量少而有效菌量增加1～4倍。

经过试产比较，本发明采用板框过滤后热风干燥成粉方法浓缩菌种芽孢，比其它浓缩方法(如喷雾干燥或高速离心法)更节省能源和成本而回收率高，因而是一种最经济有效的微生物肥料菌种粉制造新技术。

本发明的目的可以通过以下技术措施实现：

一、菌种发酵培养技术

(一)菌种

1.固氮芽孢杆菌：采用前项发明专利申请书(95117432·0)中的专利菌种CN9506。固氮芽孢杆菌CN9506已于1995年8月4日在中国专利局指定保藏单位一中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，编号为CCTCC M95040。此后将这一菌株称作固氮芽孢杆菌CCTCC M95040，为便于叙述，本文将这一菌株简称为“固氮菌”。

本发明所用固氮菌特点为固氮酶活性高(1100-3200毫微克分子乙烯/毫克蛋白/小时)，能产生休眠芽孢，可耐受80℃高温干燥；制作芽孢粉后密封保存不易污染杂菌而变质，可长期贮存备用。

2.磷细菌：所述磷细菌是指巨大芽孢杆菌(Bacilllusmegatherium)ACCC 10010，因其能分解土壤难溶性磷，因此俗称为磷细菌。磷细菌已在中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心(ACCC)保藏，编号为ACCC10010，公众可按保藏号向该保藏中心购买磷细菌。

3.钾细菌：所述钾细菌是指胶冻样芽孢杆菌(Bacilllus mu-cilaginosus)ACCC10013此菌具有分解土壤矿物中钾素能力，因此俗称钾细菌。钾细菌已在农业微生物中心保藏，编号为AC-CC10013，公众可按号索取。

(二)培养发酵条件：包括上述固氮菌、磷细菌和钾细菌菌种的培养发酵条件。

1.固氮菌的培养发酵可使用公知的培养条件和方法。一般培养时间是20～24小时，培养温度是25～30℃，培养pH是7.0～7.4，通气量0.5～1∶1立方米/1000升，搅拌速度200～300转/分。本菌种优选的培养时间是30小时形成芽孢，培养温度32℃，培养pH7.7，通气量0.5-1∶1立方米/1000升，罐压0.5kg/cm²，搅拌速度200转/分。其优选培养基如下：

筛选及保存菌种用无氮培养基：

蔗糖                            1.00％

酵母膏                          0.10％