[发明专利]具有免疫抑制作用的山茱萸提取物及其制备工艺

说明书

本发明是一种具有免疫抑制作用的中草药提取物，具体说是一种具有免疫抑制作用的山茱萸提取物，本发明还涉及所述山茱萸提取物的制备工艺，属于中药领域。

山茱萸(Cornus officinalis Sieb et Zu cc)是平补阴阳的中药。有补益肝肾、收敛固涩的功效。近年来，国内外学者对山茱萸进行了多方面的研究，由于所分离出的有效成分不同，所以，对于山茱萸有效成分的药理作用报道也各不相同。文献报道山茱萸水煎提取物对体液免疫具有一定的增强作用，而对迟发型超敏反应中T淋巴细胞的活化和淋巴因子的释放具有抑制作用[中国药科大学学报1990；21(4)：226-228]；山茱萸水提取物对炎症反应具有抑制作用[中国中药杂志1992；17(5)：307-309]；李洁等报道山茱萸生药和炙药的水煎剂均具有免疫抑制作用[中日友好医院学报1996；10(1)：43-45]山茱萸总甙的药理作用主要表现为免疫抑制作用；但是现有技术从未公开过山茱萸总甙的制备方法。山茱萸成分比较复杂，简单地水煎提取物由于所含成分较多，药理研究结果多有偏差，对于山茱萸不同有效成分的分离，有助于更加清楚的研究山茱萸的药理作用，对于药物开发具有重要的意义。由于现有技术所说的山茱萸总甙是一个部分提纯的混合物，不排除还有其它成分混入，所以上述药理作用也并非是某一单一成分的作用。因此，对于山茱萸不同药理作用的有效成分进行进一步分离，是进行药物开发和药理研究的基本前提。

本发明目的是提供一种具有免疫抑制作用和抗炎作用的山茱萸提取物。

本发明目的还在于提供一种具有免疫抑制作用和抗炎作用的山茱萸提取物的提取工艺。

本发明是通过如下技术方案完成的。

本发明所述的具有免疫抑制作用和抗炎作用的山茱萸提取物是按照如下提取工艺制备的提取物：

将山茱萸加水10-30倍量，煎煮2-4次，煎煮以微沸为度，每次煎煮时间为0.5-2小时，煎煮液滤过，合并，静置备用；

取极性或非极性大孔吸附树脂，按与生药重量比1∶1-1∶5的比例装柱，优选以与生药重量比1∶1-1∶2的比例装柱，然后将上述水煎液以10-30毫升/分钟的流速通过此大孔吸附树脂柱，完全通过后，用80-95％的乙醇洗脱柱子，优选用95％的乙醇洗脱柱子，收集洗脱液，真空干燥后，得到山茱萸提取物，此提取物的分子量大约是150-3000。

本发明所说的山茱萸提取物的提取方法中，所使用的大孔吸附树脂可以用NKA-II型极性大孔吸附树脂(购自南开大学化工厂，平均孔径：145-155)；AAS型极性大孔吸附树脂(购自南开大学化工厂，平均孔径：155-165)。

本发明所说的山茱萸可以是山茱萸的生药，也可以是山茱萸的炙药。

本发明山茱萸提取物具有显著的免疫抑制作用和抗炎作用。该提取物能够明显的抑制小鼠淋巴细胞转化、LAK细胞生成和体内服用抑制白细胞介素2(IL-2)的产生；该提取物体外抑制小鼠和人的混合淋巴细胞反应，抑制细胞毒性T细胞的诱导和增殖，抑制白细胞介素2受体表达；实验表明：本发明的山茱萸提取物能够显著抑制小鼠单核巨噬细胞系统对刚果红的廓清、对角叉菜胶所致的大鼠、小鼠足肿胀均有显著的抑制作用，对大鼠佐剂性关节炎有显著疗效。

实施例1

取山茱萸生药1000克，加水14000克，煎煮两次，每次煎煮时间是加热微沸后1小时，过滤，合并滤液，备用；

取H-103型非极性大孔吸附树脂1500克装柱，将上述全部水提液以15毫升/分钟的流速通过该大孔吸附树脂柱，然后用95％乙醇洗脱，合并洗脱液，真空干燥后得到山茱萸提取物干粉。

实施例2

取山茱萸生药1000克，加水22000克，煎煮三次，每次煎煮时间是加热微沸后1小时，过滤，合并滤液，备用；

取NKA-II型极性大孔吸附树脂1500克装柱，将上述全部水提液以10毫升/分钟的流速通过该大孔吸附树脂柱，然后用95％乙醇洗脱，合并洗脱液，真空干燥后得到山茱萸提取物干粉。

实施例3

取山茱萸生药1000克，加水22000克，煎煮两次，每次煎煮时间是加热微沸后1小时，过滤，合并滤液，备用；

取AAS型极性大孔吸附树脂1500克装柱，将上述全部水提液以15毫升/分钟的流速通过该大孔吸附树脂柱，然后用95％乙醇洗脱，合并洗脱液，真空干燥后得到山茱萸提取物干粉。