[发明专利]氧化苦参碱在制备治疗乙型肝炎药物中的应用

说明书

本发明涉及氧化苦参碱在制备治疗乙型肝炎药物中的应用。

由于乙型肝炎遍布全世界，全世界大约有3亿多人为乙肝病毒携带者，其中中国占1.2亿，这就是说，中国占世界乙肝病毒携带者的1/3。乙型肝炎可以导致慢性肝炎、肝硬化和原发肝癌，在全世界每年大约有200万人死于乙肝引起的肝硬化和肝癌，而我国又是乙型肝炎的高发区，乙型肝炎的总感染率为60％，其中乙肝病毒携带率约为10％，全国以12亿人口计，约有6亿人受到过乙肝感染，在这些携带者中，有25％的人一生中发展为各种类型的肝病，全国现有慢性乙肝病人约1200万，这给人民健康和国民经济带来极大损失，因此，研究乙肝的治疗问题是全社会面临的重大课题。

目前治疗乙肝药物包括(1)对症治疗和保肝药物；(2)免疫调节剂和免疫抑制剂；(3)针对病毒复制或抑制病毒复制的药物。前两类药物对病人有辅助治疗作用，并不能从根本上治疗乙型肝炎。在第三类药物中，国外使用最多的是α-干扰素，它主要作用于病毒复制的合成酶，抑制DNA复制，可以使43％的病人HBV-DNA转阴，但该药的严重缺点是“反跳”，即在停药以后又恢复原来状态；尽管现在有基因重组干扰素，但价格仍然很贵，是一般工薪阶层所不能负担，且对于有自身免疫和肝硬化的病人不能应用。阿糖腺苷也能抑制乙肝病毒，由于它对骨髓和胃肠道有毒性作用，在国外已经淘汰。阿昔洛韦是治疗单纯疱疹、EB病毒、带状疱疹病毒感染，国内也有人用它来治疗乙肝，同样因有＂反跳＂和毒性作用，并未被医院接受，所以，寻找新的药物，事在必行。

本发明目的为氧化苦参碱在制备治疗乙型肝炎药物中的应用。针对目前治疗乙肝药物上述(1)，(2)类不能从根本治疗乙肝，第(3)类药物可抑制DNA复制，可使部分病人HBV-DNA转阴，但有“反跳”现象，而且价格昂贵。为此，根据氧化苦参碱可抑制乙肝病毒复制的特性，提供用氧化苦参碱制备的治疗乙型肝炎的药物。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

氧化苦参碱是从苦参和苦豆子中提取的一种白色固体，其分子式C₁₅H₂₄N₂O₂，纯度在99％以上，余量是水分。用无热源去离子的纯净蒸馏水将氧化苦参碱溶解，配制成100mg/ml的注射剂-即苦参素注射液。以往用于治疗肿瘤在化疗或放疗后引起的白血球减少，以及其它原因引起的白血球减少症，有效率达85％以上。在大量临床治疗白血球减少症过程中，苦参素注射液对乙型肝炎也有很好的治疗作用，为此，利用苦参素注射液治疗乙型肝炎，进行了大量的科学实验和临床验证工作，进一步证实氧化苦参碱是制备治疗乙型肝炎的有效药物。具体实验和临床结果分述于下：

一、动物实验：在上海市传染病院肝炎研究室进行。

1、毒性试验：以昆明种小鼠腹腔注射氧化苦参碱制备的苦参素注射液，LD₅₀为750mg/Kg，静脉注射LD₅₀为150mg/Kg，以北京大耳自家兔静脉注射，LD₅₀为120mg/Kg。结果说明该药物毒性非常低，临床使用安全。

2、苦参素注射液的药理、病理、抗乙型肝炎病毒(HBV)试验：

(一)实验方法：选择十月龄不分性别但体重相近的麻鸭，随机分组，在相同条件下饲养。鸭乙型肝炎(DHB)模型是以鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染制作。

实验用苦参素注射液，即实施例1所生产的制剂，分为0.05g/Kg、0.15g/kg和0.45g/kg三个治疗组；阿昔洛韦治疗对照组，剂量为100mg/Kg；DHBV-DNA阳性对照组；DHBV-DNA阴性对照组和健康麻鸭苦参素治疗组，各组均为12只。

各组均采用腿部肌肉注射途径给药，每周3次，隔日给药，连续12周。DHBV DNA(+)和DHBV DNA(-)两个对照组肌肉注射生理盐水(1ml/kg)。以上各组麻鸭分别在给药前、给药第四周、第八周、第十二周和停药后第二周同时静脉采血，作血清DHBV DNA斑点杂交试验。在停药后第二周，各组麻鸭同时放血至死，取肝脏，置于福尔马林固定液和2.5％戊二醛固定液中保存，作鸭肝的光学显微镜和电子显微镜检查。

(二)、实验结果：

①、药理作用：静脉注射后，氧化苦参碱进入细胞内的微粒体，作用细胞代谢酶，特别是进入肝细胞的微粒体，作用于乙肝病毒，各组麻鸭血清DHBV DNA测定，如表1所示。