[发明专利]脂类分散液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明一种用作测定脂类含量的标准溶液的水分散液以及这种分散液的制备方法。

背景技术

目前，业已迅速广泛地利用一种近期开发出的酶促测定法来测定体液中的脂类含量，尤其是测定胆固醇的含量，并且这种脂类测定方法在临床诊断领域中用得愈来愈多。因此，需要一种合适的用于测定脂类含量的标准溶液。然而，脂类本质上难溶于水，于是，专门使用那些溶于有机溶剂的脂类标准溶液。因此，这些标准溶液中的脂类在存在状态和流动性方面与体液(例如血清)中的脂类不同。这会导致标准溶液与作为样品的体液(例如血清)之间在反应性上具有较大差异，从而使测定值发生偏差。

因此，业已使用来源于人或动物的血清或提纯脂蛋白胆固醇作为标准溶液。例如，在日本专利公开文本No.56-101555中描述了这种纯化脂蛋白胆固醇的方法。然而，在使用血清的方法中，要得到廉价的血清是困难的，同时，未知杂质可能会影响测定值。用于纯化脂蛋白的方法还具有操作复杂的问题。

为了改善这些缺陷，业已使用那些用表面活性剂加溶于水的脂类作为标准溶液。然而，需要大量的表面活性剂来使脂类加溶于水。因此，利用此方法制备的溶液的粘度高，并且有时处理起来困难。    

为了解决这个问题，建议采用表面活性剂和脂类的混合物，其中表面活性剂和脂类的HLB值不同(例如参见日本公开专利文本No.57-84356)。然而，对于利用此方法得到的溶液，在上述的酶促测定方法中，溶液中存在的表面活性剂有时会抑制酶促反应。由于脂类的分散形式与血清中的不同，因此按照此测定方法，这种溶液有时不适于用作标准溶液。

如上所述，业已研究出各种利用一个简单的操作过程即可稳定溶解或分散脂类的方法。

然而，如上所述脂类的这种分散形式明显不同于血清中的分散形式的事实，有时会造成问题，即阻碍将此溶液用作校正仪器的标准溶液。考虑到这一点，还是利用了用表面活性剂分散脂类的方法。然而，当可以使用表面活性剂时还有一个问题即是：不能稳定地分散生理上产生的较高浓度的胆固醇。

为了解决上述这些问题，本发明的发明人进行了深入的研究。结果，发现一种分散液表现出作为胆固醇标准溶液的极好特性，如下制备这种分散液：首先将胆固醇、卵磷脂、一种表面活性剂以及一种中性类脂和/或一种胆甾醇酯按一特定的浓度比范围加入到有机溶剂中，其次从制得的混合物中蒸发掉有机溶剂，然后使得到的类似薄膜的混合物用温度被加热到比卵磷脂的相变温度高的水或缓冲液溶胀，最后利用超声辐射分散此溶液而得到这种分散液。

发明简介

本发明提供了一种脂类分散液，包括以下组分：一种胆汁酸或其盐、用作脂类的一种磷脂、胆固醇以及从胆甾醇脂和中性类脂构成的组合中选择的至少一种组分，还有作为分散介质的水或一种含水溶剂，其中胆汁酸或其盐以及脂类被分散在水或含水溶剂中。

本发明还提供了一种制备脂类分散液的方法，包括如下步骤：首先将胆汁酸或其盐以及脂类溶于有机溶剂中，然后将有机溶剂从得到的溶液中蒸发掉，最后将水或含水溶剂加入到所含的残留的固体中，以便施加一个物理剪切力。

施加物理剪切力的步骤最好是在脱氧的气氛下进行的。

另外，蒸发有机溶剂的步骤最好是在胆汁酸或其盐以及脂类能溶于有机溶剂的温度下进行。

脂类包括一种磷脂、胆固醇以及从胆甾醇酯和中性类脂构成的组合中选择的至少一种组分。

在本发明的一个实施例中，优选的是：将胆固醇亚油酸酯用作胆固醇和胆甾醇酯，将卵磷酯用作磷脂，将牛磺脱氧胆酸钠用作胆酸盐，以及将三硬脂酸甘油酯用作中性类脂。并且较为可取的是：胆固醇以及胆甾醇酯的总和与卵磷脂的重量比为1∶1至1∶4，胆酸盐与卵磷脂的重量比为1∶1至1∶20，中性类脂与卵磷脂的重量比为1∶10至1∶5，以及当卵磷脂最后分散于水或缓冲剂中时卵磷脂的浓度不超过1000mg/dl。

利用上述方法制备的胆固醇标准溶液具有与在血清脂类相似的分散形式和粒度，并且能提供一种胆固醇和胆甾醇酯的总浓度约少于1000mg/dl的分散液。如此制备的胆固醇分散液相当稳定并且能贮存一段长的时间。

从以下结合附图所进行的详细描述中将更好地理解和体会本发明(关于构成和内容)以及本发明的其它目的和性质，同时所附的权利要求书中特别阐明了本发明的这些新颖特性。

具体实施方式

下面的例子进一步详细说明了本发明，但不能认为是对本发明范围的限制。例1