[发明专利]稳定结晶的四氢叶酸盐

说明书

本发明涉及结晶的N-〔4-〔〔2-氨基-1,4,5,6,7,8-六氢-4-氧代-(6S)-,-(6R)-和-(6R,S)-蝶啶基)甲基〕氨基〕苯甲酰基〕-L-谷氨酸盐(下文称四氢叶酸盐)，涉及它们的应用以及涉及制备它们的方法。

四氢叶酸衍生物含有两个不对称中心。在这方面，由于这些衍生物由叶酸、N-(蝶酰基)-L-谷氨酸合成，在谷氨酸基中所含有的光学活性碳原子以L-形式存在，而通常由蝶酰基5,6位中的双键加氢在6位中形成的光学活性碳原子以外消旋(6R,S)形式存在。因此四氢叶酸的合成衍生物由2种非对映异构体的1∶1混合物组成。

作为药物,四氢叶酸盐主要使用5-甲酰基-5,6,7,8-四氢叶酸(甲酰四氢叶酸)的钙盐或5-甲基-5,6,7,8-四氢叶酸的钙盐，用于治疗巨红细胞叶酸盆血症，作为解毒药以提高叶酸拮抗物特别是氨基蝶呤和氨甲蝶呤在癌症治疗中的相容性(“抗叶酸盐援救”)，用于提高氟化嘧唑的治疗效果和用于治疗自身免疫疾病，如牛皮癣和风湿性关节炎，用于提高某些杀寄生虫药如三甲氧苄二氮嘧啶-磺胺甲氧唑的相容性以及用于降低二去氮杂四氢叶酸盐(dideazatetrahydrofalates)在化疗中的毒性。在人体中，单个四氢叶酸盐可相互转化(叶酸盐循环)。四氢叶酸在这样的过程中起主要作用。四氢叶酸也用作制备各种四氢叶酸衍生物的基础物质。

迄今，由于难以生产药物有效成分合格纯度的四氢叶酸盐以及由四于氢叶酸极不稳定，特别是对氧化作用高的敏感性，四氢叶酸盐直接用作药物或用作制备各种四氢叶酸衍生物的基础物质都失败了[有关这点参见A.L.Fitzhugh,Pteridine 4(4),187～191(1993)]。在这方面，应当指出，对于四氢叶酸盐的肠胃外应用(在药物领域它是最常用的)，给药的溶液至少接近中性pH值是必须遵循的先决条件。对于这一应用来说，四氢叶酸盐因此是优选的应用形式。为了克服四氢叶酸的不稳定性，已采用了各种方法，例如尽可能完全的排除氧，或者加入抗氧剂如抗坏血酸。但是，对于药物使用来说，完全排除氧几乎是不可能的，既使可能做到也需很高的费用；同样加抗氧剂也未必可能用于药品应用。因此，迄今仍未找到适合在商业上用于制备高纯度的和足够稳定性的四氢叶酸盐，从而使四氢叶酸盐的药物应用成为可能的可行方法。

令人吃惊的是，现已发现，可通过相应的光学纯(6S)-或光学纯(6R)-四氢叶酸盐，富含(6S)-或富含(6R)-四氢叶酸盐，或(6R,S)四氢叶酸盐结晶，得到有极好稳定性的高纯度(6S)-、(6R)-或(6R,S)-四氢叶酸盐。如此得到的结晶(6S)-，(6R)-和/或(6R,S)-四氢叶酸盐实际上在室温下，在适合的形式中是极稳定的。它们适合作药物的成分或生产药物的原料，或者作工业生产高纯度的其他四氢叶酸衍生物的原料。

因此，本发明涉及(6R,S)-,(6S)-和(6R)-四氢叶酸结晶的盐。碱土金属盐，特别是钙盐或镁盐优选用作结晶的四氢叶酸盐。

本发明还涉及一种制备结晶的(6R,S)-,(6S)-和(6R)-四氢叶酸盐的方法，其特征在于相应的四氢叶酸盐进行结晶。在这方面，四氢叶酸盐优选在pH值7～10下从极性介质中进行结晶。

最适合作极性介质的物质是水或水与其相混溶的有机溶剂的混合物，如水溶性醇如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、乙二醇，低分子量脂族水溶性羧酸如甲酸、乙酸或乳酸，或者水溶性酰胺如甲酰胺、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、1-甲基吡咯烷酮、2-甲基吡咯烷酮或2-哌啶酮。对于所用溶剂的类型和混合比没有具体的限制，因为结晶四氢叶酸盐通常比相应的无定形形式有更低的溶解度。

结晶优选在升温下特别是在50～90℃下进行，或从稀溶液特别是1～10％溶液中结晶。

(6S)-,(6R)-和(6R,S)-四氢叶酸盐的晶化自发产生，或者用相应的结晶四氢叶酸盐接种进行晶化。

无定形的或结晶的纯(6S)-或(6R)-四氢叶酸优选用作晶化的原料。但是，外消旋(6R,S)-四氢叶酸也可使用，因为可富集(6S)-或(6R)-四氢叶酸。在这里适合的原料包括两种分离的固体，如根据EP-495204制备的(6R,S)-四氢叶酸、(6S)-四氢叶酸-硫酸和磺酸加成盐，以及通过催化加氢或氢硼化物还原由叶酸就地制备的四氢叶酸。

由于无定形或部分结晶的光学纯四氢叶酸或其盐作为晶化的原料，用所述的方法可得到在此以前不能达到的纯度(＞98％)和稳定性的盐。