[发明专利]一种层析用硅胶及其制法和用途

说明书

本发明涉及一种层析用硅胶及其制法；本发明还涉及超氧化物歧化酶(SOD)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)的提纯方法。

超氧化物歧化酶SOD(superoxide dismutase)是存在于备注血液中的一种酶，能歧化分解超氧自由基O₂以保护机体，目前已作为系列化药物，用于防治癌、辐射病及抗衰老，一些高级护肤品中也加入SOD，SOD可由牛血、猪血和人血的红细胞提取。人绒毛促性腺激素，HCG(human chorionic gonadotrophin)是存在于孕妇尿中的一种激素，用于孕妇和某些肿瘤的诊断，不孕妇的治疗和避孕等。HCG可从孕妇尿中提取。

目前SOD和HCG的提取国内都采用DEAE纤维素(DEAE-Cellulose 32)，一般均用进口产品，价格昂贵，须回收反复使用，因此SOD和HCG的生产流程长，生产成本高。市售的层析硅胶都不能代替DEAE纤维素，用于SOD和HCG的分离提纯。

本发明的目的在于提供一种能替代DEAE纤维素用作SOD、HCG分离提纯吸附剂的，成本较低的层析用硅胶。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的。

本发明的层析硅胶是在硅酸溶液中加入尿素和甲醛溶液，加碱在油状有机介质中悬浮聚合得到硅胶与聚脲醛的“共聚物”，冲洗除去有机介质后，灼烧除去聚脲醛，得到孔径为55-90的均匀球状颗粒硅胶。

本发明的层析硅胶的制法是：在硅酸水溶液中，加入尿素，溶解后加入甲醛溶液，搅拌均匀，加入碱溶液，混匀后将此溶液立即倒入高速搅拌的、溶有非离子型表面活性剂的油状有机介质中，进行悬浮聚合，沉淀出球状颗粒硅胶，冲洗除去有机介质，低温烘干，高温灼烧，得到具有规则层状微晶结构的、孔径为55-90的层析用硅胶。

硅酸溶液与尿素和甲醛溶液用量的比例是150ml硅酸溶液(比重1.05-1.07)加入1-6克尿素，1.68-10.1ml 36％甲醛溶液。

悬浮聚合，优选的油状有机介质是石蜡油。所用的非离子型表面活性剂，可以是甘油单硬脂酸酯，span60，丙二醇油酸酯等。

沉淀出的球状颗粒硅胶，用水冲洗，除去有机介质，在50-80℃烘干，然后在600-700℃灼烧1.5-3小时。

本发明的层析用硅胶，可替代DEAE纤维素提纯SOD和HCG。即将本发明的层析用硅胶装柱，SOD或HCG经柱层析，由于杂蛋白被较强地吸附在层析硅胶上，而SOD或HCG先被洗脱下来达到纯化的目的，活力回收率分别达到90％以上和80％以上。

本发明的层析用硅胶制作比较简易，与DEAE纤维素相比成本比较低，因此用于提纯SOD或HCG可以不需要回收，减少了提纯SOD或HCG的工艺流程，降低了SOD和HCG的成本。

以下通过实施例进一步说明本发明。

实施例1.用水玻璃制取硅酸水溶液

工业水玻璃加水，使其比重为1.07，每升此溶液加工业浓氨水30ml，搅拌5分钟以上，然后放置2天以上，这时水玻璃中的泥沙、重金属杂质等逐渐沉淀下来，倾泌出上层清液。

将阳离子交换树脂用水洗多次后，装入离入交换柱，用1.5M H₂SO₄淋洗，等流出液PH为2左右为止，此时树脂已转化为H⁺型，再用水洗至中性。

取上述净化过的水玻璃溶液流过H⁺型阳离子交换柱，等流出液的PH＜5时开始收集，直至PH＝3为止，即得硅酸水溶液，其比重为1.05-1.07。

实施例2.本发明的层析用硅胶的制取

取实施例1的方法得到的硅酸水溶液150毫升，加入工业尿素2.85克，溶解后再加入36％甲醛水溶液4.8毫升，搅拌30分钟后，加入10％碳酸氢铵(化学纯)水溶液30毫升，混合后将此溶液迅速倒入高速搅拌的200毫升石蜡油中(石蜡油中溶有甘油单硬酯酸酯400毫克)，继续搅拌40分钟，此时沉淀出圆珠形小颗粒状的硅胶，滤出硅胶，洗去石蜡油，在60℃烘干，然后在600℃灼烧1.5小时，得到本发明的层析用硅胶，其孔径为60-70。

实施例3.本发明的层析用硅胶的制取

取实施例1的方法得到硅酸水溶液150毫升，加入工业尿素5.7克，溶解后再加入36％甲醛水溶液9.6毫升，其它步骤同实施例2制得本发明的层析用硅胶，其孔径为55-65。

实施例4.本发明的层析用硅胶的制取