[发明专利]前列腺素E1原料药生产工艺

说明书

本发明涉及一种原料药的生产工艺，特别是指前列腺素E₁原料药的生产工艺。

目前，国内前列腺素E₁(简称PGE₁)原料药的生产，有的仍是手工生产，不仅产量低，而且临床副作用大，有的虽然已形成工业化生产，但只是间断性生产，而不是连续性工业化生产，生产周期较长。在国际上，如日、美、德等国均已对前列腺素E₁原料药投入工业化生产，但就产品的纯度，市场价格，成本，年产量，每批料的生产周期来说，都并不理想。

本案申请人曾于95年提出过一种前列腺素E₁原料药的生产工艺，并已申请专利，见CN951。该工艺过程是：(1)用精制哺乳动物精囊的微粒在离心机中实现复合酶纯化，送入生化反应器；(2)在生化反应器中进行仿生合成，再将其送入稀释器中；(3)在稀释器中加入丙酮及柠檬酸，使反应终止，提取PGE₁溶液，并将提出的溶液送入自动分离机；(4)分离出固态酶蛋白和水，浓缩PGE₁粗制晶体；(5)进行PGE₁的精制；(6)在层析柱中进行柱层析，将收集的纯PGE₁溶液进行结晶纯化，获得最终产品。该工艺在其产品纯度、生产成本、生产周期等方面均优于目前国内外现有生产方法，特别是在生产周期上与日、美、德等国相比缩短了6倍。

本发明的目的旨在上述研究成果的基础上，挖掘潜力，提供一种新的前列腺素E₁原料药的生产工艺，以进一步提高产品质量，降低生产成本，缩短生产周期，并可连续大规模工业化生产。

本发明提供的前列腺素E₁原料药的生产工艺，包括以下步骤：

(1)用哺乳动物精囊中酶进行固相化复合，送入特制生化反应器；

(2)在特制生化反应器中加入磷酸盐缓冲液、固相化复合酶、半胱胺盐酸盐、氢醌，通入纯氧维持反应器内压力0.005-1.0MPa，搅拌；一边连续通入磷酸盐缓冲液--二高-γ-亚麻酸溶液，一边连续流出反应液，连续进行仿生合成，流出反应液进入膜分离器中；

(3)在膜分离器中加入提取剂二氯甲烷-RX复合溶剂，其中

R包括：CH₃-～C₆H₁₃-，

X包括：-OH，-O-C₂H₅，控制分子量小于500的有机物质分子通过，无机盐及大于500以上分子量有机蛋白质拦截分离，分离出有机蛋白质作饲料添加剂，分离出反应液复合溶液，送入减压浓缩器中；

(4)在减压浓缩器中减压薄膜蒸发复合溶剂，得前列腺素E₁粗品，将粗品送入结晶器中结晶纯化；

(5)在结晶器中用三元复合溶剂H₂O-R₁X-R₂X或二元复合溶剂H₂O-R₁X将前列腺素E₁溶解、结晶纯化；

上述三元复合溶剂和二元复合溶剂中的R₁包括：CH₃-～C₆H₁₃-，R₂包括：C₂H₅-～C₈H₁₇-。

为了便于审查员清楚明了本发明所提供的技术方案，现对其作进一步说明。

将精制羊精囊、牛精囊及其它们的胰脏、胆囊(带汁)磨碎到0.003-0.005毫米微粒复合酶，用两倍以上复合酶重量的W_1-7雷尼镍或针剂用活性炭(复合酶重量的1/10-1/5)进行酶固相化，装入生化反应器吊篮中，连续加入二高-γ-亚麻酸溶液。二高-γ-亚麻酸溶液配方为：

二高-γ-亚麻酸   0.10～0.60％(作反应底物)

半胱胺盐酸盐     0.50～0.80％(作辅酶因子)

 氢      醌      0.0010～0.0050％(作活化因子)

磷酸盐缓冲液     600ml

边加入反应液，边通入纯氧气，边导出反应液，使反应同一时间进出量相等，并维持压力0.005～1.0MPa，反应温度为0～58℃。将前10分钟导出的反应液重加入反应器中，待此部分反应液加入完毕后，计12×600^m以上体积时终止反应，固相化酶若有活力仍可套用。