[发明专利]芽胞杆菌属蛋白酶

说明书

(一)发明领域

本发明涉及可从芽胞杆菌菌株中获得的洗涤剂用蛋白酶。更具体地讲，本发明涉及一种源于一种芽胞杆菌菌株I612的新型碱性蛋白酶。而且，本发明还涉及一种制备所述蛋白酶的方法、将所述蛋白酶用作洗涤剂用酶的用途、以及含有本发明蛋白酶的洗涤组合物。

(二)背景技术

洗涤剂用酶面市已超过20年时间，而且目前已在世界范围内将其确立为粉状洗涤剂和液体洗涤剂的正常成分。

用于洗涤组合物中的酶包括多种不同的酶，如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、以及其它酶，或这些酶的混合物。最重要的商业用酶是蛋白酶。

洗涤剂用蛋白酶的开发利用是这样进行的：先分离天然存在的蛋白酶，然后在洗涤组合物中进行检验。大多数洗涤剂用蛋白酶是从芽胞杆菌属(Bacillus)的成员中获得的。

商用蛋白酶制品的例子有ALCALASE^TM、ESPERASE^TM和SAVINASE^TM，以上制品均由Novo Nordisk A/S(Denmark)出售。ALCALASE^TM蛋白酶是由地衣型芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的菌株生产的，ESPERASE^TM和SAVINASE^TM蛋白酶是通过培养嗜碱性芽胞杆菌而获得的。

洗涤条件，特别是所采用的洗涤温度、所用水的硬度和洗涤剂的成分在不同国度间的差别很大。典型的条件如下：

-低pH和低水硬度：美国和亚洲的液体洗涤剂；

-低pH和高水硬度：欧洲的液体洗涤剂；

-高pH和低水硬度：美国和亚洲的粉状洗涤剂；和

-高pH和高水硬度：欧洲的粉状洗涤剂。

(洗涤剂的低pH通常在8.0-9.5的范围内，特别是在9左右；洗涤剂的高pH通常在10-11.5的范围内，特别是在10.5左右。低水硬度通常在3-6°dH范围内；高水硬度通常在15-20°dH范围内，特别是在18°dH左右)。

另外，为了使洗涤过程更有利于环境，近年来一直在对洗涤剂配方进行改变。洗涤剂工业的以上差异及变化，使得该领域极为复杂。因此，一直以来都希望找到新型的蛋白酶，这种蛋白酶在某种特定条件下表现良好。

(一)发明内容本发明的一个目的是提供在中洗涤温度至低洗涤温度下具有改善了的洗涤性能的新型洗涤剂用蛋白酶。

因此，在第一方面，本发明提供了一种蛋白酶，其特征为：

-具有相同于或部分相同于源于芽胞杆菌菌株I612，DSM9701的蛋白酶的免疫化学特性。

在第二方面，本发明涉及一种以芽胞杆菌菌株I612为代表的分离的生物学上纯的芽胞杆菌菌株培养物。在一个更具体的方面，本发明涉及一种芽胞杆菌菌株I612，DSM9701或其突变型或突变体。

在第三方面，本发明提供了一种制备所述蛋白酶的方法，该方法包括在含有碳源、氮源和无机盐的合适营养培养基中培养一种产蛋白酶的芽胞杆菌菌株I612，然后回收所需要的酶。在一个更具体的方面，对芽胞杆菌I612，DSM9701或其突变体或突变型、或另一种宿主生物进行培养，所述另一种宿主生物带有编码一种蛋白酶的基因，该蛋白酶具有相同于或部分相同于源于芽胞杆菌I612的蛋白酶的免疫化学特性。

在第四方面，要求了将所述酶用作洗涤剂用酶的用途。在更具体的方面，本发明提供了含有所述蛋白酶的洗涤组合物和洗涤剂添加剂。

在第五方面，本发明提供了包括添加所述蛋白酶的洗涤工艺。

下面将结合附图对本发明作进一步说明，其中，

图1表示温度与一种本发明的酶的蛋白分解活性之间的关系(所述酶制剂按例1方法获得，以1％酪蛋白为底物在pH9.5条件下测定)；

图2表示pH与一种本发明的酶的蛋白分解活性之间的关系(所述酶制剂按例1方法获得，以1％酪蛋白为底物在25℃温度下测得)。微生物

能够产生本发明的酶的本发明的新型微生物以自土壤样品中分离的菌株为代表。已按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约，于1995年1月30将芽胞杆菌I612保存于DSM(德国微生物和细胞培养物GmbH保藏所)，入藏编号为DSM9701。