[发明专利]特异于呼吸道合胞病毒融合蛋白的高亲和性人单克隆抗体

权利要求书

1.人单克隆抗体，所述抗体与RSV融合蛋白特异性地结合，并且对RSVF-蛋白的亲和性≤2×10^-9M。

2.权利要求1的人单克隆抗体，所述抗体可在体外中和RSV。

3.人单克隆抗体，所述抗体与RSV融合蛋白特异性地结合，并选自由RF-1，RF-2和含有RF-1或RF-2可变重链和轻链区的重组人单克隆抗体组成的组中。

4.权利要求3的人单克隆抗体，其中所述抗体是RF-1。

5.权利要求3的人单克隆抗体，其中所述抗体是RF-2。

6.权利要求3的人抗体，其中所说抗体是含有人γ1、人γ4或人γ4 PE恒定区的重组抗体。

7.被编码RF-1或RF-2重链和轻链可变区的DNA序列转染的真核细胞。

8.权利要求7的细胞，其中所述真核细胞是CHO细胞。

9.权利要求7的真核细胞，其中所述DNA序列选自图7a、7b、8a、8b、9a、9b、10a或10b中的任一个所列的DNA序列。

10.Epstein-Barr无限增殖化B细胞系，所述细胞系可分泌人单克隆抗体，所述抗体对RSV融合蛋白的亲和性≤2×10^-9M。

11.权利要求10的细胞系，其中所述抗体在体外中和RSV。

12.权利要求10的细胞系，其中所述细胞系选自RF-1和RF-2。

13.生产特异于RSV融合(F)蛋白的人抗体的方法，所述方法包括：

(i)在IL-2存在下体外致敏人脾细胞；

(ii)将所述经致敏的人脾细胞转移至SCID小鼠；

(iii)用RSVF-蛋白加强免疫所述SCID小鼠；

(iv)从所述SCID小鼠中分离可分泌特异于RSV F-蛋白的人单克隆抗体的人B细胞。

14.权利要求13的方法，其中所述经分离的人B细胞被无限增殖化。

15.权利要求14的方法，其中使用Epstein-Barr病毒(EBV)实现无限增殖化。

16.权利要求15的方法，其中使用小鼠胸腺瘤细胞系EL-4 B5作为饲养层克隆所述的EBV无限增殖化细胞。

17.权利要求13的方法，其中在IL-4或IL-6的存在下实现致敏步骤。

18.编码RF-1或RF-2可变重链和/或可变轻链区的DAN序列。

19.可表达根据权利要求18之DNA序列的表达载体。

20.权利要求18的DNA序列，所述DNA序列选自图7a、7b、8a、8b、9a、9b、10a或10b所列DNA序列。

21.在易感的或已感染RSV的人群中预防或治疗RSV感染的方法，所述方法包括施用预防或治疗有效量的一种或多种人单克隆抗体，所述抗体对RSVF-蛋白的亲和性≤2×10^-9M，并可在体外中和RSV。

22.权利要求21的方法，其中所述抗体选自RF-1、RF-2和含有RF-1或RF-2的可变重链和轻链区的重组人单克隆抗体。

23.权利要求21的方法，其中所述抗体通过注射或烟雾化的形式被施用。

24.权利要求21的方法，其中所述抗体与佐剂联合施用。

25.权利要求24的方法，其中所述佐剂是完全弗氏佐剂(CFA)、明矾或它们的联合。

26.适于预防或治疗易感或已感染RSV的人群中的RSV感染的药物组合物，所述药物组合物包括预防或治疗有效量的人单克隆抗体和药用可接受的载体，所述抗体可在体外中和RSV，对RSV F-蛋白的亲和性≤2×10^-9M。

27.权利要求26的药物组合物，其中所述人单克隆抗体选自RF-1、RF-2和含RF-1或RF-2可变重链和轻链区的重组人单克隆抗体。