[发明专利]一种具有脂解活性的修饰酶

权利要求书

1.一种具有脂解活性的修饰酶，与亲本酶比较，该修饰酶具有i)在其C-末端或N-末端的肽添加物，或ii)在其C-末端和其N-末端的肽添加物。

2.按照权利要求1的修饰酶，该修饰酶包含在其N-末端的肽添加物。

3.按照权利要求1或2的修饰酶，其中所说的肽添加物选择来增加亲本酶对其底物的亲和性。

4.按照权利要求1-3之任一的修饰的脂解酶，其中所说的肽添加物选择来使修饰的脂解酶具有稳定性。

5.按照权利要求4的修饰的脂解酶，其中所说的肽添加物是这样一种，其能够形成对亲本酶的成熟部分的共价结合。

6.按照权利要求1-5之任一的修饰的脂解酶，该酶包含在肽添加物中的半胱氨酸残基和在亲本酶的成熟部分中的半胱氨酸残基，方式是所说的半胱氨酸残基共同形成半胱氨酸桥。

7.按照权利要求6的修饰的脂解酶，其中所说的亲本酶的成熟部分中的半胱氨酸残基已被插入或者已取代亲本酶的氨基酸残基。

8.按照权利要求1-7之任一的修饰的脂解酶，其中所说的肽添加物是这样一种，其对用于表达所说的修饰的脂解酶的宿主细胞的蛋白分解酶的蛋白分解降解具有低的敏感性。

9.按照权利要求8的修饰的脂解酶，其中所说的肽添加物包含至少一个脯氨酸残基，如两个或三个脯氨酸残基。

10.按照权利要求1-9之任一的修饰的脂解酶，其中肽添加物包括至少一个，如一，两或三个荷正电的或者疏水氨基酸残基。

11.按照权利要求1-10之任一的修饰酶，其中所说的肽添加物的长度为1至500个氨基酸，优选的为1至200个氨基酸，较优选的为2至100个氨基酸，更优选的为2至50个氨基酸，最优选的为1至15个氨基酸，如1至10个或4至10个氨基酸。

12.按照权利要求1-11之任一的修饰酶，其中所说的肽添加物是下列肽添加物之一：Arg(R)，或Lys(K)，或Leu(L)，或Ile(I)，或Val(V)，或Trp(W)或Phe(F)，或Arg-Pro(RP)，或Lys-Lys(KK)，或Arg-Lys(RK)，或Lys-Arg(KR)，或Arg-Arg(RR)，或Arg-Arg-Pro(RRP)，或Arg-Pro-Val-Ser-Gln-Asp(RPVSQD)Ser-Pro-Ile-Arg-Met(SPIRM)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Ala-Arg(SPIRAR)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg(SPIRPR)或Ser-Pro-Ile-Arg-Glu-Arg(SPIRER)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Lys(SPIRK)，或Ser-Pro-Ile-Lys-Lys(SPIKK)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Arg-Pro(SPIRRP)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Arg(SPPRR)，或Ser-Pro-Iso-Pro-Arg(SPIPR)，或Ser-Pro-Arg-Pro-Arg(SPRPR)，或Ser-Pro-Ile-Arg(SPIR)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Arg(SPIRR)，或Ser-Cys-Ile-Asg-Arg，(SCIRR)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro(SPIRPRP)，或Ser-Cys-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro(SCPIRPRP)，或Ser-Pro-Arg-Arg-Pro-Arg-Thr(SPRRPRT)，或Ser-Pro-Phe-Arg-Pro-Lys-Leu(SPFRPKL)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Arg-Pro(SPPRRP)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Arg-Glu(SPIRRE)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Pro-Pro(SPPRPP)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Pro-Arg(SPPRPR)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Trp-Pro(SPPWWP)，或Ser-Pro-Pro-TrpArg-Pro(SPPWRP)，或Ser-Pro-Pro-Arg-TrpPro(SPPRWP)，或Ser-Pro-Pro-Arg-TrpPro(SPPRWP)，或Ser-His-Trp-Arg-Arg-Trp(SHWRRW)，或Ser-His-TrpArg-Lys(SHWRK)，或Ser-His-Trp-Arg-Arg(SHWRR)，或Thr-Ala-Ile-Arg-Pro-Arg-Lys(TAIRPRK)，ser-Thr-Arg-Arg-Pro-Arg-Pro(STRRPRP)，Gly-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro(GPIRPRP)，Leu-Pro-Phe-Arg-Glu-Arg-Pro(LPFRQRP)，Ser-Arg-Ser-Arg-His-AspAia(SRSRHNA)，Ile-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Arg(IPIRPRR)，Ser-Thr-Arg-Arg-Pro-Arg-Pro(STRRPRP)，Thr-Ala-Ile-Arg-Pro-Arg-Lys(TAIRPRK)，Trp-Ars-Trp-Arg-Trp-Arg(WRWRWR)，Glu-Pro-Ile-Arg-Arg(QPIRR)，Ser-His-TrpGlu-Glu(SHWQQ)，Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro(RPRPRPRP)，或Ser-Ser-Thr-Arg-Arg-Ala-Ser-Pro-Ile-Lys-Lys(SSTRRASPIKK)，或Ala-Trp-Trp-Pro-Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro(AWWPSPIRPRP)，或Ala-Pro-Pro-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro(APPPRPRPRPRP)，或Ala-Pro-Pro-Pro-Arg-Thr-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Ser(APPPRTRPRPRS)，或Ser-Pro-Lys-Arg-Lys-Pro-Arg-Pro(SPKRKPRP)，或Ser-Gln-Arg-Ile-Lys-Gln-Arg-Ile-Lys(SQRIKQRTK)，或Ser-Pro-Pro-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro(SPPPRPRP)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg(SPIRPRPRPR)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Lys-Ala-Trp-Trp-Pro(SPIRKAWWP)，或Ala-Pro-Pro-Pro-Lys-Ala-Ser-Pro-Arg-Gln-Arg-Pro(APPPKASPRQRP)，或Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro-Ser-Pro-Ile-Arg-Pro-Arg-Pro-Arg(SPIRPRPSPIRPRP)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Trp-Pro-Arg-Arg(SPPRWPRX)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Trp-Pro-Arg-Trp(SPPRWPRW)，或Ser-Pro-Pro-Arg-Trp-Pro-Trp-Arg(SPPRWPWR)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Arg-Pro-Arg-Arg(SPPWRPRR)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Trp-Pro-Arg-Trp(SPPWWPRW)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Trp-Pro-Trp-Arg(SPPWWPWR)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Trp-Pro-Trp-Trp(SPPWWPWW)，或Ser-Pro-Pro-Trp-Pro-Arg-Pro-Arg-Pro(SPPWPRPRP)。