[发明专利]水解聚酰胺的具有酰胺酶活性的酶和微生物

权利要求书

1.特别对具有至少一种下述结构式的(聚)酰胺型底物有酰胺酶活性的酶：其中：·A和B为单体单元，·R¹和R³为相同或不同(优选不同)的二价基团，代表取代或未取代、直链或支链的(环)亚烷基、亚芳基或亚芳烷基，其中芳香基团任选为缩聚物，亚烷基的碳原子数大于或等于4，优选在4和12之间，·R²为选自氢和/或最好具有1-6个碳原子的烷基的相同或不同(优选相同)的基团，·X为

^*X¹＝OH、OM或OR⁴，其中M选自金属，优选碱金属和碱土金属，R⁴为含1-6个碳原子的直链或支链烷基，

^*或X²＝

其中R²和R³如上所定义，R⁵和R⁶相同或不同，与上述R²的定义相同，·Y为

^*Y¹＝氢，

^*或Y²＝

其中R¹如上所定义，Z为氢，定义同M的M¹或R⁴，

条件是：-a-  如果X＝X¹，则Y＝Y¹，-b-  如果X＝X²，则Y＝Y²或Y¹，·最后，p为1.5-10，优选1.5-5；或其中：·R²和R³如上所定义，·U和V分别与式(I)下X¹和Y¹的定义相同，·q＝1-8，所述酶的特征在于比率大于2，优选大于或等于10，特别优选大于或等于50。

2.根据权利要求1的酶，其特征在于它由如下物质组成：→所附序列SEQ ID NO：2所示的肽序列，→和/或与该序列有至少50％同源性的多肽。

3.根据权利要求1或2的酶，其特征在于它-对ABAB型四聚体形成的底物有活性，-能够以大于60，优选大于或等于100，特别优选大于或等于1000的比活性(U_s)将该底物转变成两个二聚体AB，比活性以在给定条件下测定的所产AB的μmol×h^-1×mg^-1蛋白表示。

4.根据权利要求1-3任一项的酶，其特征在于它-对三聚体BAB形成的底物(I)有活性，-能够以大于100，优选大于或等于500的比活性(U_s)将该三聚体转变为二聚体AB和单体B，比活性以在给定条件下测定的所产AB的μmol×h/mg酶表示。

5.根据权利要求1-4任一项的酶，其特征在于它-对DP_n为3-20的低聚物形成的底物(I)有活性，-能够将这些低聚物转变成单体B、二聚体AB和三聚体ABA。

6.编码特别对如权利要求1所定义底物(I)和(II)有酰胺酶活性的酶的DNA序列，其特征在于它选自下列序列：

-相应于所附序列SEQ ID NO：1并编码具酰胺酶活性的酶的DNA序列，

-由于遗传密码的简并性造成的该序列的类似物，和

-·与这些序列之一或与其片段杂交，

 ·与这些序列之一或与其片段具有50％以上的一致性，

 ·并编码具酰胺酶活性的酶的DNA序列。

7.从权利要求6的DNA序列(高度)表达产生的并具有酰胺酶活性的酶。

8.由含质粒pXL2564的大肠杆菌菌株组成的微生物，所述菌株已于1994年11月29日以I1495号注册和保藏在Collecrion Nationale de Cultures deMicroorganiames.

9.能够产生至少一种根据权利要求1-5和7中任一项的酶的微生物。

10.根据权利要求9的微生物，其特征在于它含有权利要求6的DNA序列。