[发明专利]生产非共价复合的多价蛋白体亚基疫苗的改进方法

权利要求书

1．一种制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，它包括：

a)制备蛋白体、可透析除垢剂和两亲决定基的混合物，

b)渗滤或超滤混合物以去除除垢剂，并由此形成两亲决定基-蛋白体复合体，

c)监测两亲决定基-蛋白体复合体的形成量，

d)回收两亲决定基-蛋白体复合体。

2．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的超滤采用切向流。

3．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的超滤在选自以下组的系统中进行：中空纤维滤柱、平面式滤膜和滤膜滤柱。

4．根据权利要求3所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的超滤系统是NMWC孔径为10,000的中空纤维滤柱。

5．根据权利要求3所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的超滤系统是NMWC孔径为3,000的中空纤维滤柱。

6．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中对可透析除垢剂的监测采用连续检测透析液样品。

7．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的监测包括测定透析液或滞留物样品的光密度。

8．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的监测涉及将透析液样品与已知量的SDS(十二烷基硫酸钠)混合，在有除垢剂存在时就会形成沉淀，并测定沉淀量。

9．根据权利要求8所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中在透析液中的除垢剂被基本清除后回收LPS-蛋白体复合体。

10．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的除垢剂是Empigen BB。

11．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的两亲决定基是脂多糖。

12．根据权利要求11所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的脂多糖来自革兰氏阴性菌。

13．根据权利要求12所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的革兰氏阴性菌是邻单胞菌。

14．根据权利要求13所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的邻单胞菌是类志贺邻单胞菌。

15．根据权利要求12所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的革兰氏阴性菌是志贺氏菌。

16．根据权利要求15所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的志贺氏菌是弗莱克斯纳氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌或鲍伊德氏志贺氏菌。

17．根据权利要求12所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的革兰氏阴性菌是奈瑟氏菌。

18．根据权利要求17所述的制备蛋白体-脂多糖疫苗的方法，其中的奈瑟氏菌是脑膜炎奈瑟氏球菌。

19．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的蛋白体来自脑膜炎奈瑟氏球菌或淋病奈瑟氏菌。

20．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中在经监测的除垢剂的清除速度降低或恒定后再回收LPS-蛋白体复合体。

21．根据权利要求1所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，它还包括：

e)将回收得到的蛋白体-两亲决定基复合体与药学上认可的载体混合，形成疫苗。

22．根据权利要求21所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，它还包括在回收前浓缩LPS-蛋白体复合体。

23．根据权利要求22所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，其中的浓缩持续至达到要求的最终浓度。

24．根据权利要求21所述的制备蛋白体-两亲决定基疫苗的方法，用不同的两亲决定基实施其中的方法，形成一系列的蛋白体-两亲决定基复合体，并在步骤e)中组装成多价疫苗。

25．利用权利要求24所述的方法制备的多价疫苗。

26．一种抵抗疾病的方法，它包括给受体使用有效量的权利要求25所述的疫苗。