[发明专利]一种耐贮藏的微粒,特别是一种用于载体结合反应的载体及其生产方法无效
申请号: | 96199745.1 | 申请日: | 1996-11-22 |
公开(公告)号: | CN1207810A | 公开(公告)日: | 1999-02-10 |
发明(设计)人: | D·普拉克斯纳;E·格罗马科维斯凯尔;C·艾尔哈德特 | 申请(专利权)人: | 阿比翁参股及管理股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/546 | 分类号: | G01N33/546 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 罗宏,温宏艳 |
地址: | 联邦德*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 贮藏 微粒 特别是 用于 载体 结合 反应 及其 生产 方法 | ||
本发明的目的是一种耐贮藏的微粒,特别是一种用于载体结合反应、检测和(或)分离方法的微粒载体,生产这种耐贮藏微粒的方法,及本发明的微粒的用途。
由固体核芯和多聚物组成的微粒载体已为人知,且已应用于多种目的。尤其是,这种微粒已用作免疫测定标志,用多聚物,如生物多聚物,将固体核与亲和成分相结合。多种微粒物质已得到使用:特别是金属微粒溶胶,如有色金属微粒或磁性微粒;非金属微粒,如硒、煤粉、SiO2或陶瓷微粒;血球,甚至还有带着另一种具有不同(结合)特性的多聚物的乳胶微粒。
因此,US 4,230,685描述了特异性粘合剂与磁性微粒结合的改进:按此,用丙烯酸酯聚合物(Acrylatpolymer)或多糖涂盖在微粒上,用戊二醛将蛋白A结合在此涂层上。
US 4,452,773描述了磁性-葡聚糖微粒的生产。这类微粒的大小为100-700,尤其是300-400。有大量的微粒是胶态的,有铁磁性,带有葡聚糖的外壳。得到的微粒用高碘酸盐氧化使之功能化。
EP-B-452,342是关于涂有多糖、具有胶体大小的超顺磁微粒。这种微粒可与附加的基团相结合。将微粒混合物分选成具有一致磁化水平的一定大小的组分,该组分展现了在磁场中阻滞性(Retardierung)的均一。叙述了按照大小来分离的可能性。优选用多糖或蛋白质涂盖。多糖用高碘酸盐氧化而功能化。此外,可能用溴化氰进行功能化。蛋白外壳与微粒分子的结合可能由侧链氨基或硫氢基完成。
DE-A-4037,724是关于使用直接或间接的标志物进行免疫测定的设计。优选采用直接标志物因为它们不需要另外的步骤来使测试结果可视化。直接标志物的例子如金属溶胶,染料溶胶,乳胶微粒、颜色指示剂、脂质体上的色料及非金属溶胶如碳溶胶。DE-A-4037724的另一方面是关于一种免疫化学活性标志物。煤粉颗粒与一个配基或配基共轭物吸附结合。检测的灵敏度,以人绒毛膜促性腺激素hCG为例为25mIU/ml(IU=国际单位)。
EP-A-0,410,893描述一种在生物液体中测定和识别针对特异抗原的抗体的方法。列出的不溶性载体微粒包括:细胞、凝胶微粒、微胶囊、有机多聚物、无机细微粒、或用牛血清白蛋白或胆固醇精细分散的金属或金属化合物的胶体微粒。
EP-A-0,032,270描述用一种或几种标志化合物定量地或定性地测定一种免疫成分的方法:将这些分成直接地或间接地与在亲水染料或色素的水性分散体系中的微粒或者涂盖有这类染料或色素的多聚物核相结合。
EP-0,321,008是关于藉特异结合蛋白与样品中相应的可结合物质间的反应,测定一种或几种成分的方法。这种成分与至少一个的标志成分间的相互反应活性,是靠直接或间接地耦联或吸附标志溶胶微粒而得到的。优选的溶胶微粒为磷、碳和/或硅。将这种微粒表面用含极性基团的大分子包裹可以防止凝集和聚集,这种大分子可以是蛋白、聚乙二醇、多聚糖、聚乙烯醇及其它。适宜的保护蛋白有抗原、抗体和抗-抗体。免疫化学惰性物质如白蛋白、聚乙二醇或其它极性大分子也可使用。检测的灵敏度,以免疫球蛋白G为例,为1.5ng绝对量。
EP-0,298,368是关于使用含胶体铁金属的微粒进行诊断性免疫测定的一种方法。这种微粒带有一种结合物能特异地识别待测物质,检测hCG的灵敏度在mIU/ml范围。
EP-A-0,280,560公开了共价结合于核/外壳多聚物微粒的链球菌A抗原抗体。微粒外壳是由聚(mp-氯甲基苯乙烯)构成的,核芯则是聚(苯乙烯-CO-2-acetoacetoxidethyl methylacrylate)构成的,核内含有油红EGN,以得到一种凝聚试剂。
US 4,452,886描述赖氨酸与戊二醛及刚果红聚合成颜色微粒。对hCG的测试灵敏度在1000 IU/ml的范围。
Collins WP在他的“任选的免疫测定”一书(John Wiley & Sons,Chichester,纽约,等)的“分散染料免疫测定(DIA)”一章的48-49页中描述了微粒标志物的优点,并指出基本参数的意义,如微粒大小,分布与形式,有机溶剂中的溶解度,胶体稳定性及结合容量,譬如,对抗体的结合。他提及的测试的灵敏度在mIU/ml范围。结合物如以冻干状态贮存在-20℃或4℃,其稳定性至少为15个月,水性结合物应在制备后6天内用掉。
JP-A-0686,777是关于用胶囊包起来的调色剂及其生产。
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