[发明专利]一种角膜中期保存液

说明书

本发明涉及一种用于角膜移植术前，供人体角膜保存用的保存液，特别是一种角膜中期保存液。

角膜保存按时间分为短、中、长期保存方法。短期保存液首推M-K液，由于它的简便、经济，且能在短期内(＜4天)较好地保存内皮细胞的活性而广泛被世界上大多数眼库所使用。长期保存法分器官培养法和超低温冷冻保存法，其保存时间前者可达1月，后者可达1年以上，但这两种保存方法由于所需设备昂贵及对实验室条件要求较高，所以目前仅在世界上少数眼科中心使用，更不适合我国的国情。鉴于短期保存法的保存时间过于短暂以及长期保存法的不易推广应用，角膜保存液研制的热点集中于中期保存液，因它既具有简便价廉的优点，也能为供、受体之间的组织配型、供体病原的检测和异地运输提供时间保证，使充分利用角膜材料成为可能。就我国现状来看，角膜供体材料来源严重匮乏，又缺乏足够数量的正规眼库，所以研制理想的新型角膜中期保存液以最大限度地利用有限的供体材料也是符合我国国情的研究课题。

目前世界范围内所使用的角膜中期保存液有K液(参见美国眼科杂志1984年98卷112-114页)，由美国Kaufman等人研制；CSM液(又称硫酸软骨紊保存液，参见美国眼科移植学杂志1987年85卷332-349页)；Dexsol液(参见美国眼科研究与视科学杂志1988年29卷增刊111页)和Optisol液(参见美国眼科学文献杂志1991年109卷864-868页)。

以上保存液在世界范围内的眼库得到广泛使用，其有效角膜保存时间为7-10天，但经K液保存后的角膜较厚，不利于手术操作。CSM液也存在同样缺点。Dexsol液和Optisol液虽不存在这种缺点，但前者保持角膜内皮细胞活性的作用不及后者，后者又存在价格昂贵的缺点。而且以上所有的中期保存液配制的指导思想均是欲为组织和细胞提供一尽可能接近生理状态的营养及能量代谢环境(即36℃左右)。不容忽视的是，角膜保存是在4℃情况下进行，低温情况下细胞的代谢状态将不同于36℃左右的生理环境，如果在设计保存液时不将此加以考虑，显然是不妥当的，也就不可能更好地保持组织细胞的活性。

本发明的目的是研制一种角膜中期保存液，它可以起到改善保存角膜内皮细胞活性的作用，从而提高了角膜保存的质量。据统计，目前全国约有300多万因角膜病致盲的患者，角膜移植术尤其是穿透性角膜移植术是这些患者的重要复明手段。随着手术器械的改进，显微手术的开展以及新型免疫抑制剂的应用，穿透性角膜移植术的成功率相应提高，加之角膜无血管和淋巴管，具有相对“免疫赦免区”的特性，使角膜移植手术的成功率居于各器官移植手术之首。然而角膜材料的来源以及角膜材料保存的质量仍严重制约着角膜移植手术的开展和成功。所以，寻找离体状态下维持角膜内皮细胞活性的关键因素，探索理想且实用的角膜保存方法，是本发明所要解决的问题。

本发明是这样实现的：一种角膜中期保存液的配方(以配制1000毫升为例)是：

          低限量基础培养基        5～7克

          组织培养基199           3～4克

          F12培养基               3～4克

          硫酸软骨素              20～30克

          右旋糖酐(分子量40000)   15～25克

          HEPES缓冲盐             5～6克

          高钾任氏液              20～30ml

          硫酸锌                  3～5mg

          抗生素                  4～6ml

          蒸馏水                  964～976ml

本发明还可以是这样实现的：(配制1000毫升角膜中期保存液的配方)

          低限量基础培养基        5.8克

          组织培养基199           3.6克

            F12培养基                3.5克

            硫酸软骨素               25克

            右旋糖酐(分子量40000)    20克

            HEPES缓冲盐              5.96克