[发明专利]一种新的人红细胞生成素无效
申请号: | 97105034.1 | 申请日: | 1997-01-17 |
公开(公告)号: | CN1168413A | 公开(公告)日: | 1997-12-24 |
发明(设计)人: | 娄丹;徐莉萍;邹钟诚 | 申请(专利权)人: | 沈阳三生药业有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/85;A61K38/18;C07K14/505 |
代理公司: | 沈阳市专利事务所 | 代理人: | 杨滨 |
地址: | 110141 辽宁省沈阳*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红细胞 生成 | ||
1.一种人红细胞生成素蛋白,其特征是:
(1)SDS-PAGE表观分子量为36~45KD
(2)肽链部分 APP RLICDSRVLE RYLLEAKEAE
NITTGCAEHC SLNENITVPD TKVNFYAWKR MEVGQQAVEV WQGLALLSEA
VLRGQALLVN SSQPWEPLQL HVDKAVSGLR SLTTLLRALR AQKEAISPPD
AASAAPLRTI TADTFRKLFR VYSNFLRGKL KLYTGEACRR GDR
(3)第113位氨基酸残基为Arg,第163位氨基酸残基为Arg。
(4)由CHO细胞表达,为一糖蛋白。
2.红细胞生成素蛋白的衍生物,其特征是:由权利要求1中的全部或部分氨基酸序列组成,具有人红细胞生成素活性,包括糖基化形式及非糖基化形式。
3.一种编码人红细胞生成素的DNA分子,其特征是:
(1)其全序列为: ATGGGGGTG CACGAATGTC
CTGCCTGGCT GTGGCTTCTC CTGTCCCTGC TGTCGCTCCC TCTGGGCCTC
CCAGTCCTGG GCGCCCCACC ACGCCTCATC TGTGACAGCC GAGTCCTGGA
GAGGTACCTC TTGGAGGCCA AGGAGGCCGA GAATATCACG ACGGGCTGTG
CTGAACACTG CAGCTTGAAT GAGAATATCA CTGTCCCAGA CACCAAAGTT
AATTTCTATG CCTGGAAGAG GATGGAGGTC GGGCAGCAGG CCGTAGAAGT
CTGGCAGGGC CTGGCCCTGC TGTCGGAAGC TGTCCTGCGG GGCCAGGCCC
TGTTGGTCAA CTCTTCCCAG CCGTGGGAGC CCCTGCAGCT GCATGTGGAT
AAAGCCCTCA GTGGCCTTCG CAGCCTCACC ACTCTGCTTC GGGCTCTGCG
AGCCCAGAAG GAAGCCATCT CCCCTCCAGA TGCGGCCTCA GCTGCTCCAC
TCCGAACAAT CACTGCTGAC ACTTTCCGCA AACTCTTCCG AGTCTACTCC
AATTTCCTCC GGGGAAAGCT GAAGCTGTAC ACAGGGGAGG CCTGCAGGAG
AGGGGACAGA
(2)第418位碱基为C,第569位碱基为G。
4.一种新的重组质粒pE/C,其特征是:
(1)该质粒由表1.中的6079个碱基组成
(2)该质粒中第899-1477个碱基为权利要求3中的DNA分子
(3)该质粒与质pDHFR共转染二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢细胞,可用于表达权利要求1中的人红细胞生成素。这里的质粒pDHFR购自Invitrogen。
5.表达人红细胞生成素的基因工程细胞株,其特征是:
(1)由权利要求4中的质粒pE/C与质粒pDHFR共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞得到。这里的质粒pDHFR购自Invitrogen,中国仓鼠卵巢细胞购自美国菌种保藏中心。(2)经培养可以表达权利要求1中的人红细胞生成素。(3)该细胞株对权利要求1中的人红细胞生成素的表达量达到10000U/ml.106细胞。
6.一种具有人红细胞生成素活性的药品,其特征是:权利要求1或2中的蛋白作为该药品的全部或部分活性组分。
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