[发明专利]龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法。

现有技术中，PCT/CN 95/00001公开了一种含龟和鳖的组合物及其制备方法和应用，实际生产时，由于鳖的价格极其昂贵，故所制成的混合后的粉末价格很高，尽管它有很高的营养价值，但仍使许多消费者无力购买。

本发明的目的在于提供一种价格低廉且具有较高营养价值的龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法。

本发明的技术方案是：一种龟粉和蛇粉的组合物，它包括重量比为10％～40％的龟粉和60％～90％的蛇粉。龟蛇组合物的制备方法是：将龟及蛇去除内脏，用清水漂洗干净，再用100℃的蒸气灭菌2小时，然后在80～100℃的温度下干燥24小时，再将所述的干燥后的龟蛇原料粉碎成80目以下的粉末，按配比混合均匀，填充于胶囊中。

本发明经实验表明具有下列优点：

一.龟蛇粉对免疫功能的调节作用(本实验由南京医科大学营养与食品科学技术研究所进行)：

1.材料与方法：

1.1受试样品：

龟蛇粉由中外合资苏州朗力福保健品有限公司提供，该制剂为胶囊，每粒为04g，成份的重量比为龟20％，蛇80％(其中乌梢蛇50％，蝮蛇30％)。

1.2试验动物：

昆明种小鼠体重20～25g，由江苏省实验动物中心提供。合格证号：苏动(环)95100号和苏动(质)95035号。

1.3剂量分组：

根据龟蛇粉人体摄入量(0.4g×2粒×3次/日/人，相当于40mg/kg体重)，分别按其10倍、20倍、40倍设计三个剂量组及阴性对照组，即400mg/kg、800mg/kg、1600mg/kg及蒸馏水对照组，每日灌胃一次，连续30日。

1.4试验方法：按《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行。

1.4.1二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠DTH(耳肿胀法)

1.4.1.1分组及给样：

取体重20～25g的雄性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分别灌服龟蛇粉低、中、高剂量即400mg/kg、800/kg、1600mg/kg及阴性对照(蒸馏水)，每日一次，连续30日。

1.4.1.2致敏：

每鼠腹部皮肤用硫化钡脱毛，范围约3cm×3cm，用1％DNFB溶液50ul均匀涂抹致敏。

1.4.1.3攻击：

5日后用1％DNFB溶液10ul均匀抹于小鼠右耳(两面)进行攻击。

1.4.1.4测定：

攻击后24小时颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，称重。    

1.4.1.5数据处理：

以左右耳重量之差表示DTH的程度，采用方差分析进行数据统计。

1.4.2血清溶血素测定：

1.4.2.1分组及给样：

取体重20～25g的雌性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分组及给样方法同前。

1.4.2.2 SRBC及补体制备：

按检验方法进行。

1.4.2.3免疫动物及血清分离：

每鼠腹腔注射2％SRBC悬液0.2ml，4日后摘眼球取血，分离血清。

1.4.2.4溶血反应：

血清250倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。

1.4.2.5数据处理：

溶血素的量以半数溶血值(HC50)表示，用方差分析进行数据统计。

1.4.3小鼠碳廓清试验

1.4.3.1分组及给样：

取体重20～25g雄性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分组及给样方法同前。

1.4.3.2测定：

每鼠尾静脉注入四倍稀释的印度墨汁(0.1ml/10g体重)，注入后2分钟及10分钟分别从内眦静脉丛取血20ul，并将其加到2ml的Na2CO3溶液中，用分光光度计在600nm波长处测光密度值。同时将小鼠处死，取肝脏和脾脏称重。

1.4.3.3数据处理：

用校正的吞噬指数a表示小鼠碳廓清能力，用方差分析进行数据统计。

1.4.4脏器/体重比值

1.4.4.1分组及给样：

同小鼠碳廊清试验。

1.4.4.2测定：

末次给样后24小时处死小鼠，称体重，取胸腺、脾脏并称重。1.4.4.3数据处理：用方差分析进行数据统计。2.结果2.1龟蛇粉对DNFB诱导小鼠DTH的影响：表1结果表明，龟蛇粉对DNFB诱导小鼠DTH未产生明显影响。