[发明专利]抗病型增效菌及其培养方法

说明书

本发明涉及一种微生物及其培养方法，具体涉及一种抗病型增效菌及其培养方法。

防治水稻纹枯病的生物抗菌素－井岗霉素延用至今，在我国已有二十多年，由于药剂的单一性使药效有所下降，甚至加大用量效果仍不理想。如何提高井岗霉素对水稻纹枯病的防治效果已成为科研的热点，开发新型制剂，使之达到比井岗霉素更好的防治和增产效果，已成为本领域中技术人员的攻关方向。

目前市场上出售的增产菌，是根据微生态学理论选育出的一种对作物生长有增产作用的微生物菌，增产菌对作物有明显的增产作用，但在防治水稻纹枯病的试验中，增产菌并未显示出防治效果。

本发明的目的在于提供一种抗病型增效菌SD₂₃及其培养方法。

作为本发明的抗病型增产菌SD₂₃，根据动植物细菌命名法为蜡状芽孢杆菌(Bacillus Cereus)，该菌株已于1997年6月25日送交北京，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：CGMCC No．0310。

本发明的上述目的是通过以下方式实现的：一种抗病型增产菌的培养方法，它包括以下培养步骤：首先将出发菌株DM423接于斜面培养基上，在30℃培养2～3天，其次将斜面培养基上的孢子冲洗下来，制成孢子悬浮液，最后将经过诱变处理或自然分离的孢子涂在培养皿的培养基上，在32℃下培养2～3天，挑选生长好的菌落，重复三次，得到目标菌株SD₂₃。

本发明的抗病型增效菌SD₂₃为蜡状芽孢杆菌(Bacillus Cereus)，已经在北京，中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：CGMCCNO．0310。

本发明的优点是明显的：

a．菌种安全性高

由于该产品的应用对象是农作物，对菌种的安全性理应有较高的要求，为确保本发明产品的高安全性，本发明选用了作为治疗婴幼儿腹泻的DM423菌株(芽孢杆菌)该菌株已通过动物安全试验、毒性试验、临床应用等，安全可靠性高。

b．对稻麦有增产作用

以DM423菌株作为出发菌株。通过对单子叶作物的亲和性选择试验和应用试验，优选出对水稻、麦子等单子叶作物增产作用明显的菌株作为本发明的生产用菌株。

c．兼有抗生素和抗病菌的双重效果：

本发明的菌株与生物抗生素井岗霉素配成复合制剂，既提高了防治效果。又增加了产量，使井岗霉素这个老产品焕发青春，为我国水稻生产发展、开发绿色食品和无公害农业以及替代化学农药或少用化学农药开辟了具有重要意义的途径。

本发明抗病型增产菌的培养方法，其优选的培养方案如下：

一、见图1

第一轮：

将出发菌株DM423用诱变剂进行处理，从中选出200个单孢子菌株，然后进行初筛，选出50株，再进行复筛选出5株。

第二轮：

将上述选出的5株菌株作为出发菌株，用5种诱变剂进行处理，每种处理筛选出40个菌株，然后经过初筛选出50株，再经复筛选出5株。

第三轮：

将上述第二轮最后得到的5株菌株再经5种诱变剂进行处理，每种处理筛选出40个菌株，然后经过初筛选出50株，再经复筛选出5株。

二、适应性菌株的培养：

1．选配了不同程度的耐药性培养基，

以井岗霉素浓度不同分别为：

1号    井岗霉素含量为    10000ppm

2号    井岗霉素含量为    20000pm

3号    井岗霉素含量为    30000ppm

4号    井岗霉素含量为    40000ppm

5号    井岗霉素含量为    5000ppm

2．找出菌株在井岗霉素不同浓度中的生长关系：

以相同含量的菌株稀释液同剂量置于以上培养基中培养观察分析生长情况，生长情况定量考查如下表：