[发明专利]多脱氧核苷酸的合成方法、染色体DNA的合成方法以及染色体的制造方法

权利要求书

1.一种多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，在没有模板和/或引物的存在下，加热含有脱氧核苷酸和蛋白质的反应液，使其按规定时间反应，使脱氧核苷酸聚合。

2.如权利要求1中记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述蛋白质是耐热性的脱氧核苷酸聚合酶。

3.如权利要求2中记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述耐热性脱氧核苷酸聚合酶是属于Thermococcus属的细菌的脱氧核苷酸聚合酶或是属于Thermus属的细菌的脱氧核苷酸聚合酶。

4.如权利要求3中记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，属于上述Thermococcus属的细菌是Thermococcus litoralis。

5.如权利要求3中记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，属于Thermus的细菌是Thermus thermophilus和Thermus aquaticus。

6.如权利要求4记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述的脱氧核苷酸至少都含有脱氧腺苷5′-三磷酸(dATP)和脱氧胸腺嘧啶核苷5′-三磷酸(dTTP)。

7.如权利要求6记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述脱氧核苷酸还含有脱氧胞嘧啶核苷5′-三磷酸(dCTP)和脱氧鸟苷5′-三磷酸(dGTP)或不含有dGTP。

8.如权利要求1或权利要求2记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，在大约20～90℃的温度下进行反应。

9.如权利要求1或权利要求2记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，在大约60～90℃的温度下进行反应。

10.如权利要求1或权利要求2记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，在弱酸性、中性或弱碱性的溶液条件下进行反应。

11.如权利要求1或权利要求2记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，反应是在pH6～10条件下进行的。

12.一种多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，是经过以下工序合成的，

(a)将编码蛋白质的基因插入表达载体的工序；

(b)将上述表达载体导入细胞的工序；

(c)在上述细胞内使上述蛋白质表达、产生的工序；

(d)在产生的蛋白质存在下使脱氧核苷酸聚合，于该细胞内合成DNA工序。

13.如权利要求12记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述蛋白质是耐热性脱氧核苷酸聚合酶。

14.如权利要求13记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，上述耐热的脱氧核苷酸聚合酶是属于Thermococcus属的细菌的脱氧核苷酸聚合酶或是属于Thermus属的细菌的脱氧核苷酸聚合酶。

15.如权利要求14记载的多脱氧核苷酸的合成方法，共特征在于，属于上述Thermococcus属的细菌是Thermococcus litoralis。

16.如权利要求14记载的多脱氧核苷酸的合成方法，其特征在于，属于上述Thermus属的细菌是Thermus thermophilus和Thermusaquaticus。

17.一种双链的多脱氧核苷酸，其特征在于，是通过权利要求1～16中的任一项记载的合成方法制造的。

18.如权利要求17记载的多脱氧核苷酸，其特征在于，碱基序列中有TATCTAGA的重复序列。

19.如权利要求17记载的多脱氧核苷酸，其特征在于，碱基序列中有CTATCTAGATAT的重复序列。

20.如权利要求17记载的多脱氧核苷酸，其特征在于，碱基序列中含有TAGATATCTAGATCTAGATATCTATCTAGATATC的序列。

21.多脱氧核苷酸探针，其特征在于，权利要求17～20中任一项记载的多脱氧核苷酸通过放射性同位素或荧光化合物等标记化合物被标记。