[发明专利]牛脑神经肽FF的制备方法

说明书

本发明涉及一种牛脑神经肽FF的制备方法，脑神经肽FF是动物和人脑中天然存在的内源性吗啡和抗吗啡类物质，属于戒毒物质技术领域。如何有效地戒毒，已成为人们普遍关注的社会问题，药物戒毒是最有效的戒毒手段，目前国内广泛采用的方法有：(1)成瘾药品递减疗法，如采用美沙酮等药品，(2)暂时解除意识疗法，如采用安定等睡眠药物，(3)综合疗法，如用美沙酮、丁丙诺非，纳洛酮，纳曲酮分阶段治疗等药物，这些方法虽有一定效果，但又都不很理想，最近美、日等国一些科学家已从一些动物和人脑中发现了一种天然内源性吗啡和抗吗啡类物质，研究发现，这类物质在脱毒、戒瘾、康复、防复吸阶段发挥作用，如果进一步开发利用这类物质，将会从根本上达到戒毒的目的。

1975年美国科学家Hunghes等人在动物脑中发现了内源性类吗啡神经肽以来，已有许多天然内源性类吗啡和抗吗啡神经肽被发现。1979年，日本科学家Rakagi等人从牛脑中发现了一种天然内源性类吗啡肽，并证明这种牛脑肽具有吗啡类物质所具有的止痛作用。1985年，美国科学家Yang等人从牛脑中首次发现了两种抗吗啡类神经肽。它们具有抑制和减少吗啡诱导的各种生物学效应的作用。1991年，美国科学家Rothmam等人报告牛脑神经肽FF(一种八肽。其氨基酸排列顺序为：Phe-Leu-Phe-Gle-Pro-Gln-Arg-Phe-NH₂)具有下调吗啡Mu受体结合位的作用。1996年，美国科学家Goodman等人也报告说当同时给小鼠服用牛脑神经肽FF和吗啡时，牛脑神经肽FF也同样具有下调吗啡Mu受体结合位的功能。这些杰出的研究工作都表明存在于人及动物脑中的与吗啡作用相关的神经肽的重要作用。

对于牛脑神经肽FF的制备方法，除了1985年Yang等人报告的对牛脑神经肽FF的制备方法之外，对国内外各种文献的检索都未发现新的制备方法的报导。Yang等人报告的制备方法包括，图2所示的33个步骤，可分为两个阶段：

(1)初步处理和提取阶段

(2)纯化制备阶段

Yang等人报告的上述制备牛脑神经肽FF的方法和工艺存在的问题是：

1.Yang等人的制备方法和工艺非常复杂。从牛脑中制备出牛脑神经肽FF，需要至少33个以上的处理制备过程。

2.所用溶液有酸(三氟己酸)，有机溶剂(氰酸甲烷)和带毒性物质(基乙醇)，这不仅为进一步除去这些溶液造成因难，而且影响牛脑神经肽FF的质量。

3.Yang等人的方法中用90℃水浴将牛脑煮10分钟处理不利于保持牛脑神经肽FF的生物活性。

4.Yang等人的方法中设备条件要求高，价格昂贵，如Hplc需要数十万元的高效液相色谱仪，尤其是FMRF-NH₂抗血清CNBr活化的Sephrarose 4B亲合柱造价极其昂贵。这样制备的牛脑神经肽FF的价格也相应地非常昂贵。

5.Yang等人报告的方法中，制备过程复杂，制备得率低，难以深入开发，应用。    

本发明的目的就是针对上述问题，旨在导找一种新的简便廉价和得率高的制备方法以制备牛脑神经肽FF。

以下结合图1对本发明的制备方法作以下具体说明。