[发明专利]甘草甜素精制方法

说明书

本发明涉及一种甘草甜素分离纯化的方法

甘草甜素是甘草中甜味有效成份甘草酸的铵、钾、钠盐统称，广泛应用于食品、药品、化妆品中。有关较高纯度甘草甜素精制方法报道较多，但由于甘草中除甘草酸外，还含有大量的物理化学性质相近的有色物质，苦涩味物质及其它成份，如甘草查尔酮、甘草素、甘草异黄酮及阿魏酸等，在提取纯化过程中较难简单的除净，因此需要多步及多种溶剂精制，进而而导致收率下降，操作不便，生产费用高等。

近年来报道的选择性树脂吸附分离纯化甘草酸制取甘草甜素的方法，如JP-55-13217，虽然提高了收率，但分离效果和产品纯度不理想。为获得纯度较高的甘草甜素，本发明提供了一种甘草甜素精制方法。

本发明目的在于，所述的甘草甜素精制方法，是将甘草或甘草粗提物经稀氨水提取，酸析、醇提、碱析，用水溶解，调PH值，采用大孔吸附树脂吸附，用水洗脱浓缩，用稀乙醇结晶脱盐，即得较高纯度的甘草甜素，该方法操作简单，安全可靠，成本低，有机溶剂用量少，产品纯度高，甜味纯正，口感好等特点，采用该方法能获得甘草酸含量为70％以上(HPLC，外标法)的甘草甜素。

本发明所述的甘草甜素精制方法，首先将甘草或甘草粗提物经稀氨水提取，矿酸酸化沉淀，沉淀物用乙醇提取，所得醇提取液用氨或氢氧化钠调PH7-9碱析沉淀，然后将沉淀物溶解于水中，用乙酸调PH5-7，经苯乙烯或二乙烯苯为骨架的大孔吸附树脂D101或D2820吸附，再用水洗脱，浓缩，用60-80％稀乙醇结晶脱盐得甘草甜素，吸附树脂再生，采用PH8-9的稀氨水逆向洗脱，水洗净即可反复使用。采用苯乙烯或二乙烯苯为骨架的大孔吸附树脂D101或D2820在吸附前用乙酸调PH为4.5-6.5进行活化。

本发明所述的甘草甜素精制方法，其原理为：首先将甘草或甘草粗提物的提取液用等电点沉淀富集甘草酸，再用乙醇提取除去植物多糖、蛋白等高分子物质，最后利用黄酮类及其它酚性物质在碱性醇或稀醇中易溶，而此条件下甘草甜素微溶的性质，除去大部分酚类酸性物质，这样能较大幅度减轻吸附树脂的负荷，进而增加了树脂的利用率，由于前处理除去大部分弱极性物质，吸附树脂再生时用稀氨水也能得到再生，这样可以减少或不用稀乙醇氨改性液再生。在大孔吸附树脂吸附液接触时，在弱酸性环境下对吸附液中极性相对低的杂质易吸附，而对亲水性强的甘草酸不易吸附，因此用水能完全洗脱分离，为避免柱体的PH值被动，提高纯化效果，吸附树脂采用稀乙酸处理，以增强吸附树脂的活性，在树脂纯化时引入的乙酸，利用稀乙醇简单结晶脱盐可方便除去，因此洗脱水液经浓缩，结晶即得较高纯度的甘草甜素。

实施例1 

称取粉碎甘草1000克(甘草酸含量2.01％ )，用稀氨水提取，收集提取液4升左右，用50％硫酸搅拌调节PH为2.0酸析沉淀待沉降完全后，去上清液，水洗、离心甩干得酸化沉降物(干物质重84.9克，甘草酸含量23.21％ )、此酸化沉降物用500ml95％乙醇分两次温热提取，滤净不溶物质，将母液中通入氨气，搅拌下调PH7.5进行碱析，待析出物完全沉降，去上清液，析出物用少量乙醇洗涤，离心或抽滤后，立即溶于300ml水中，用乙酸调节PH为5-7得到待吸附液，此待吸附液上树脂体积500ml，并用乙酸调节为6.2的D101吸附树脂柱，树脂柱用1000ml水洗脱，收集含甘草酸洗脱液，减压浓缩至70-80ml时加入100ml乙醇，冷却自然结晶，离心去母液干燥后得淡黄色甘草甜素22.6克，甘草酸含量73.24％。树脂柱再生采用PH8-9的稀氨水400mol逆流洗脱，水洗、用乙酸调整树脂PH6.5左右，即可反复使用。

实施例2

称取粉碎甘草1000克(甘草酸含量2.01％ )，用稀氨水提取，收集提取液4升左右，用50％硫酸搅拌调节PH为2.0酸析沉淀，待沉降完全后，经干燥粉碎，用90％工业乙醇600ml分两次回流提取，合并提取液，滤净不溶物质，加入氢氧化钠浓碱调PH7.5左右碱析，待析出物完全沉降，去上清液，析出物用少量乙醇洗涤，离心甩干后，立即溶于300ml水中，用乙酸调PH6.2-6.5得待吸附液。此待吸附液上树脂体500ml，并用乙酸调PH为6.2左右的D2820吸附树脂柱，将树脂柱用1000ml水洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至70ml时，加入100ml乙醇，冷却自然结晶，离心去溶剂，干燥得淡黄色甘草甜素23.3克，甘草酸含量70.23％。树脂柱再生采用PH8-9的稀氨水400ml逆流洗脱、水洗、用乙酸调整树脂PH6.5左右，即可反复使用。