[发明专利]一种枯草芽孢杆菌活菌制剂及其制做方法有效
申请号: | 97117033.9 | 申请日: | 1997-09-26 |
公开(公告)号: | CN1059235C | 公开(公告)日: | 2000-12-06 |
发明(设计)人: | 魏涛;王焕芹 | 申请(专利权)人: | 北京英特莱幸诺生物技术有限责任公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K35/74;A61K47/36;//;C12R1125) |
代理公司: | 北京市专利事务所 | 代理人: | 程凤儒 |
地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 制剂 及其 制做 方法 | ||
1、一种枯草芽孢杆菌活菌制剂,其特征在于:该药剂中各组份的重量比为:
枯草芽孢杆菌的原菌粉为1.5-2.5份(重量份数)
赋形剂为96-100份(重量份数)
其中枯草芽孢杆菌的原菌粉中的活菌数为≥200亿个活菌/克,所述枯草芽孢杆菌的保藏号为0321,保藏单位:CGMCC。
2、根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂,其特征在于:所述赋形剂为乳糖和可溶性淀粉,其中乳糖与可溶性淀粉的重量比为:
乳糖 9-11份(重量份数)
可溶性淀粉 87-89份(重量份数)
所述原菌粉是由湿菌体和无水碳酸钙按1∶3重量比混匀干燥制成的。
3、根据权利要求1或2所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂,其特征在于:所述制剂为干粉制剂。
4、制做权利要求1所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的方法,其特征在于:该枯草芽孢杆菌活菌制剂是经过下述方法制成的:
(1)生产菌种活化检定
无菌启开枯草芽孢杆菌BS-3的冻干菌种,接种营养肉汤培养液中管内,在20℃-45℃条件下培养18-24小时,然后划线转种于营养平板,在20℃-45℃条件下培养18-24小时,挑典型菌落,进行形态学与特性检定,
(2)种子液的制备
将上述检定合格的纯培养物,接种于营养肉汤培养瓶内,在20℃-45℃条件下培养18-24小时,进行纯菌及菌形特征检查,
(3)配制培养基
将牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠加入蒸馏水中,上述各组份在蒸馏水中按1000毫升的溶液所含的重量(g)的组份配制:牛肉膏4-6克/1000毫升,蛋白胨9-11克/1000毫升,葡萄糖9-11克/1000毫升、氯化钠4-6克/1000毫升,将上述混合物加热溶解后,调PH为7.0-7.2,15磅压力下灭菌20-30分钟,即制成培养菌液,
(4)接种培养
将上述检定合格的种子液按1-3%的体积比例接种至上述培养液中,在20℃-45℃条件下培养48-72小时,检查芽孢形成的比率,并要求生孢率达90%以上,
(5)收集菌体
将上述培养到期的培养物,经纯菌试验确认无杂菌污染后,离心弃上清,然后收集湿菌体,
(6)制备原菌粉
用灭菌的无水碳酸钙与上述湿菌体混合搅拌成湿菌粉,之后在70℃-80℃条件下干燥,研磨成干粉即原菌粉,所述原菌粉的活菌数控制为≥200亿个活菌/克,
(7)拌粉
将上述原菌粉按上述重量比例加入灭菌过筛的赋形剂,充分搅匀后,即制成枯草芽孢杆菌活菌制剂,该制剂的活菌数为≥1亿个活菌/克。
5、根据权利要求4所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制做方法,其特征在于:所述的赋形剂为乳糖和可溶性淀粉,其中乳糖与可溶性淀粉在该活菌制剂中的重量份数比为:
乳糖 9-11份(重量份数)
可溶性淀粉 87-89份(重量份数)
所述湿菌体和无水碳酸钙按1∶3重量比混匀。
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