[发明专利]制备依托泊甙的中间体及其制备方法

说明书

本发明涉及制备抗癌化合物的新方法和制备这些抗癌化合物的新的中间体。本发明尤其涉及制备4’-去甲表鬼臼脂素甙4’-磷酸酯的方法和用于制备这些磷酸酯的中间体化合物。特别是本发明涉及到制备依托泊甙磷酸酯和由依托泊甙磷酸酯制备依托泊甙的方法。

依托泊甙和替尼泊甙是4’-去甲表鬼臼脂素甙衍生物，广泛用于临床治疗癌症。尤其在美国已被批准治疗小细胞肺癌和睾丸癌。然而依托泊甙水溶解度有限，使制成适宜的剂型有困难。

为了提高依托泊甙的水溶解度和提高用药的能力，制成了依托泊甙磷酸酯作为前药。依托泊甙磷酸酯在体内代谢成依托泊甙后才可被机体利用。一个水溶性前药的实例叙述于美国专利4,904,768，该专利公开了在4’-位带有磷酸酯基的4’-去甲表鬼臼脂素衍生物，为水溶性前药。其中公开的一个实例是依托泊甙4’-磷酸酯。依托泊甙4’-磷酸酯的制法是将依托泊甙与三氯氧化磷反应后，水解，或将依托泊甙与氯代磷酸二苯酯反应，再氢化除去苯基。

表鬼臼脂素甙的制备还公布于美国专利No.4,997,931中。4’-去甲表鬼臼脂素甙的制备方法是将4’-保护的4’-去甲表鬼臼脂素与保护的糖缩合。生成的化合物再经衍生化，生成相应的4’-磷酸酯。

以前制备依托泊甙和依托泊甙磷酸酯的方法有代表性的是需要将酚加以保护，再与经保护的糖结合，然后除掉保护基因。此外，这些方法多数需要对羟基和磷酸酯基进行保护。不同的保护基需要多个步骤以除去各个保护基因。除去保护基各步常常需要酸性或碱性条件，这会使终产物降解，使收率降低。

依托泊甙磷酸酯通常由依托泊甙经磷酸化和除去保护基等附加步骤来制备。这些多步骤反应会导致所需化合物的总收率降低，并由于在依托泊甙上的甙羟基不希望有磷酸化反应，使成本增高并且难以制备这些化合物。

本发明涉及一种制备4’-去甲表鬼臼脂素甙4’-磷酸酯，特别是依托泊甙磷酸酯的方法，该方法是将新的被保护的糖与新的被保护的4’-去甲基-4-表鬼臼脂素-4’-磷酸酯偶联。更具体地说，本发明涉及二(芳甲基)保护的糖和四芳甲基保护的4’-去甲基-4-表鬼臼脂素甙4’-磷酸酯和由此制备依托泊甙磷酸酯的方法。在羟基和磷酸酯基上的芳甲基保护基可以是相同的，也可以是不同的，优选为苄基或被如下一个或多个基团取代的苄基：C_1-4烷基、羟基、苯基、苄基、卤素、烷氧基、硝基、羧酸及其酯。4’-去甲基-4-表鬼臼脂素-4’-磷酸二(芳甲基)酯的制法是在适当溶剂中将酚与亚磷酸二(芳甲基)酯、四卤甲烷、三乙胺和酰化催化剂反应。

按照本发明的一个实例，被保护的糖是2，3-二-O-苄基-4，6-O-亚乙基-α，β-D-吡喃葡萄糖，后者在溶剂中与4’-去甲基-4-表鬼臼脂素磷酸二苄酯偶联，生成四苄基保护的依托泊甙磷酸酯。被保护的依托泊甙4’-磷酸酯经结晶或重结晶回收C-1”-β-端基异构体。甙基及磷酸酯基上的保护基经氢化或其它适宜方法可同时被除去，生成依托泊甙磷酸酯。

整个过程可有效率地生成纯净的依托泊甙4’-磷酸酯，而无需另行纯化。被保护的二苄基-4-(2，3-二-O-苄基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡糖基)-4’-二甲基-4-表鬼臼脂素-4’-磷酸酯容易自反应介质中结晶出来，或重结晶出来，以基本纯净的形式分离出C-1”-β体。所需的端基异构体的分离通常只经过一步结晶就可得到。

具体地说，本发明涉及一种制备式V化合物的方法，该方法包括将式IIIb化合物与式II化合物在路易斯酸存在下于反应介质中反应，式中R₁是芳甲基羟基保护基，R₂是芳甲基或两个R₂基共同是C_1-5亚烷基，R₃是芳甲基，R₁、R₂和R₃是相同的或不同的，反应生成式IVb化合物，选择性地结晶出式IVb化合物的C-1”-β端基异构体，然后除去羟基和磷酸酯基保护基，若R₂是芳甲基羟基保护基，则使化合物IVb与具有1-5个碳原子的羰基或其缩醛等同物反应。