[发明专利]稳定的瞬时基因表达

权利要求书

1．提高外源基因在真核细胞中的瞬时表达的方法，所述方法包括：

将编码蛋白质的外源DNA分子以能够在细胞中表达的形式导入细胞；和

在导入DNA前，过程中或之后，将所述细胞与瞬时表达提高剂接触。

2．权利要求1的方法，其中所述试剂诱导细胞利用蛋白质或氨基酸作为其主要能源。

3．权利要求1的方法，其中所述瞬时表达提高剂包括至少一种具有下式的羧酸衍生物：其中R₁是：

CHNH₂R₃，其中R₃是天然氨基酸的侧链；

C₆H₄R₄，其中R₄是H、CH₃,(CH₂)_nCH₃,NH₂,COCH₃,CO(CH₂)_nCH₃,C(CH₃)₃,CH(CH₃)₂,(CH₂)_nCH(CH₃)₂,(CH₂)_nCOCH₃,OCH₃，或O(CH₂)_nCH₃，其中n=1-3；

CHNH₂(CH₂)_nR₅，其中n=1-7,R₅是CH₃,OH,CONH₂,C₆H₄OH或CONHNH₂；

(CH₂)_nR₆，其中n=1-9,R₆是吲哚基，NCH₃C(=NH)NH₂,SCH₃,NH₂,CH₃,CO₂H,CONH₂或NHC(=NH)NH₂；

(CH₂)_nCHNH₂CO₂H，其中n=1-8；

CH(CO₂H)NHCONH₂；

C₅H₄N；并且

其中R₂选自H、CH₃,(CH₂)_nCH₃，其中n=1-8,(CH₂)_xO(CH₂)_yCH₃或(CH₂)_xCO(CH₂)_yCH₃，其中x+y=2-7，或者M，其中M是金属平衡离子或低分子量有机阳离子。

4．权利要求3的方法，其中所述瞬时表达提高剂包括选自下列的氨基酸衍生物：3-甲基-L-组氨酸，α-酮戊二酸，β-丙氨酸，肌肽，瓜氨酸，肌酸，叶酸，谷胱甘肽，马尿酸，高丝氨酸，N-(4-氨基苄基)-L-谷氨酸二乙酯，N-氨甲酰基天冬氨酸，N-甲酰基-L-甲硫氨酸和鸟氨酸。

5．权利要求3的方法，其中R₁是非极性的和疏水的。

6．权利要求1的方法，其中所述瞬时表达提高剂包括具有下式的磺酸衍生物：R₇-SO₂-OR₈

其中R₇是低级烷基、芳基、取代的低级烷基、芳基、取代的低级烷基或取代的芳基；和

R₈是氢，金属平衡离子，或低分子量的有机阳离子。