[发明专利]产生原生殖细胞和转基因动物物种的方法无效
| 申请号： | 97180552.0 | 申请日： | 1997-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN1241210A | 公开（公告）日： | 2000-01-12 |
| 发明（设计）人： | J·A·皮德拉希塔;F·W·巴泽尔 | 申请（专利权）人： | 得克萨斯农业及机械体系综合大学 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;A01K67/027 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 卢新华,齐曾度 |
| 地址： | 美国得克萨*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 产生 生殖细胞 转基因 动物 物种 方法 | ||
1.培养非啮齿类动物物种的原生殖细胞的方法，包括平板接种含非啮齿类动物物种的原生殖细胞的一种组合物在密度为约1.5×105细胞/平方厘米和约106细胞/平方厘米之间的饲养细胞上，其培养基中包含有效量的碱性成纤维细胞生长因子。
2.权利要求1的方法，其中所述饲养细胞密度在约2×105细胞/平方厘米和约5×105细胞/平方厘米之间。
3.权利要求1或2的方法，其中所述饲养细胞是非S1/S14细胞或S1-m220细胞。
4.前述任一权利要求的方法，其中所述饲养细胞是STO饲养细胞。
5.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基不包括外源加入的可溶性干细胞因子。
6.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基不包括外源加入的白血病抑制因子。
7.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基不包括外源加入的可溶性干细胞因子并且不包括外源加入的白血病抑制因子。
8.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基包含浓度在约5纳克/毫升和约100微克/毫升之间的碱性成纤维细胞生长因子。
9.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的子宫铁蛋白。
10.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含浓度在约1纳克/毫升和约100微克/毫升之间的子宫铁蛋白。
11.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的α2-巨球蛋白。
12.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含浓度在约10纳克/毫升和约10微克/毫升之间的α2-巨球蛋白。
13.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的对所述非啮齿类动物是非必需的氨基酸。
14.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含浓度在约10nM和约250nM之间的对所述非啮齿类动物是非必需的氨基酸。
15.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的L谷氨酰胺。
16.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含浓度在约0.1mM和约50mM之间的L-谷氨酰胺。
17.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的β-巯基乙醇。
18.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基进一步包含浓度在约1μM和约1mM之间的β-巯基乙醇。
19.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基包含有效量的碱性成纤维细胞生长因子和结合有效量的至少两种以下物质：子宫铁蛋白，α2-巨球蛋白，对所述非啮齿类动物非必需的氨基酸，L-谷氨酰胺或β-巯基乙醇。
20.前述任一权利要求的方法，其中所述培养基包含Dulbecco改进的Eagle培养基，Ham’s F10培养基或50∶50体积/体积的Dulbecco改进的Eagle培养基和Ham’s F10培养基的混合物。
21.权利要求1的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的白血病抑制因子。
22.权利要求21的方法，其中所述培养基进包含浓度在约5纳克/毫升和约100微克/毫升之间的白血病抑制因子。
23.权利要求1的方法，其中所述培养基进一步包含有效量的可溶性干细胞因子。
24.权利要求23的方法，其中所述培养基包含浓度在约1纳克/毫升和约100微克/毫升之间的可溶性干细胞因子。
25.权利要求1的方法，其中所述培养基包含有效量的碱性成纤维细胞生长因子和结合有效量的子宫铁蛋白，α2-巨球蛋白与白血病抑制因子。
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